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无机焦磷酸酶(酵母)

英文名称:Pyrophosphatase Inorganic(yeast)
CAS:9024-82-2
货号: HBP000501 HBP000502 HBP000505 HBP000503 HBP000504
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中文:无机焦磷酸酶(酵母)
英文:Pyrophosphatase Inorganic(yeast)
CAS:9024-82-2
分子式:C21H27NO4
纯度:≥98%
货期:24h
货号:HBP000501
规格:100μL
中文同义词:无机焦磷酸化酶,无机焦磷酸酶(酵母),
英文同义词:Pyrophosphatase Inorganic(yeast)

产品概述

无机焦磷酸酶(酵母),来源于携带有酿酒酵母无机焦磷酸酶基因的重组大肠杆菌菌株,该酶可催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐:P207–4+H20→2HP04–2 在核酸扩增、体外转录等反应中,无机焦磷酸酶可水解随着这些反应生成的无机焦磷酸盐,从而解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制。焦磷酸盐的去除可使反应平衡向产物生成端平移,有利于提高合成产物的产量。例如 RNA 和 DNA 的合成反应,在无机焦磷酸酶的作用下,反应平衡向合成产物方向移动。

产品储存: -25~-15℃ 储存,有效期2年(避免反复冻融)。

储存缓冲液: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol, 50%glycerol。

活性定义

在标准反应条件下,每分钟催化水解无机焦磷酸盐生成 1μmol 磷酸盐所需要的酶量为1个活性单位(U)。

标准反应条件为:500μL 反应体系中包含 100 mM Tris-HCl (pH 7.2,25℃)、2 mMMgCl2 和 2 mM 无机焦磷酸盐,于 25℃ 反应 10 min。

蛋白分子量:无机焦磷酸酶(酵母)的分子量为 71 kDa。

质量控制:核酸外切酶活性:0.1 U 的本品和 1μg λ -Hind III digest DNA 在 37℃ 下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

核酸内切酶活性:0.1 U 的本品和 1μg λ DNA 在 37℃ 下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

切口酶活性:0.1 U的本品和1μg pBR322在37℃ 下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

RNase 活性:0.1 U的本品和1.6μg MS2RNA在37℃下反应4小时,RNA 的电泳谱带不发生变化;

大肠杆菌DNA残留检测:0.1 U本品中残留的核酸经E.coli 16s  rDNA 特异性的 Taq Man qPCR 检测, E.coli 基因组残留≤1拷贝;

细菌内毒素(Endotoxin):LAL-Test,中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法通则(1143),细菌内毒素含量 ≤10 EU/mg。

产品应用

1.转录反应中提高RNA的产量。

注意事项

1.  本品在多种反应Buffer中均具有活性,通常本品在 HDA 扩增和 LAMP 扩增等实验中可直接接入。

2.  本品的用量在不同的实验中需要优化,通常在 0.05-1 U/mL 浓度之间调整,其中体外转录体系建议使用 4 U/mL。

3. 本品在 16~37°C 均具有活性,但最适反应温度为 25°C。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Q:嘌呤核苷酸磷酸化酶是什么?

嘌呤核苷磷酸化酶purine nucleoside phosphorylase,简称PNP或PNPase,该酶是嘌呤补救合成合成途径的关键酶之一,广泛存在于原核和真核生物中。

Q:总胆汁酸(TBA)溶液是什么?

体检TBA——总胆汁酸 ,正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸(DCA)还有少量石胆酸(LCA)和微量熊脱氧胆酸(UDCA),合称总胆汁酸(TBA)。   总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸,然后被肝细胞分泌入胆汁,随胆汁至肠道后,在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸,有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。如此循环不息。这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害。

Q:总胆汁酸(TBA)是什么?

1、血清总胆汁酸(TBA)是肝脏分泌到胆汁中最多的有机酸,肝功能受损时,胆汁酸代谢发生了变化,血中TBA很易升高,因此TBA已被认为是肝实质性损伤的灵敏指标。可以作为判断肝胆系统正常与否的重要信息。正常值0-10u mol/L,你的化验值22.6是升高的,可以作为早期肝损害的反映,但是应该结合其他肝脏功能检查,经过系统检查后再定。2、白细胞计数正常参考值:(4~10)×109/L(4000~10000/mm3)增高主要是急性感染、严重组织损伤、大出血、中毒、恶性肿瘤及白血病等。正常血液中含有粒性、单核性和淋巴性三类白细胞。粒细胞又根据胞浆中含有的颗粒性质不同,分为嗜酸性、嗜碱性及中性粒细胞三种。

Q:总胆汁酸(TBA)检测试剂盒?

总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(循环酶法)由试剂1和试剂2组成,试剂1包括:硫代辅酶、Good’s缓冲液(pH9.2);试剂2包括:3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、还原性辅酶(NADH)。基本参数:空白吸光度(光径1.0cm,波长410nm)≤0.50;空白吸光度变化率:△A/min<0.04;分析灵敏度:在测量50μmol/L的被测物时,吸光度变化率应在0.01~0.31之间;线性范围 0~180μmol/L,r≥0.990;批内精密度 CV≤10%;批间差 R≤10%;准确度:相对偏差≤10%。

Q:硫代氧化型辅酶性状?

硫代氧化型辅酶性状:淡黄色或黄绿色粉末,溶于水:50mg/ml,溶液呈清澈黄色至暗黄绿色,用途:生化研究,诊断试剂原料,保存:-20℃。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶作用?

该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶的应用?

嘌呤核苷磷酸化酶在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶分类?

嘌呤核苷磷酸化酶按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmophilusTH 6-2)PNP为三聚体,亚基分子量为30~32kDa,通常只接受肌苷、鸟苷为底物;某些微生物,如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌,会同时存在两种聚体PNP。

Q:α-L-岩藻糖苷酶是什么?

α-L-岩藻糖苷酶是一种溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织细胞、血液和体液中,参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。在原发性肝癌患者血清中增高,是原发性肝癌的标志物之一。

Q:α-L-岩藻糖苷酶临床意义?

α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高,它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。

α-L-岩藻糖苷酶临床意义:

降低:见于遗传性α-L-岩藻糖苷酶缺乏引起的岩藻糖积蓄病。

升高:见于原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、急性肝炎等。

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