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碱性磷酸酶(ALP)

英文名称:Alkaline Phosphatase
CAS:9001-78-9
货号: HBP001201 HBP001202 HBP001203 HBP001204 HBP001205
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中文:碱性磷酸酶(ALP)
英文:Alkaline Phosphatase
CAS:9001-78-9
分子式:C21H36N8O6
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HBP001201
规格:100μL
中文同义词:碱性磷酸酶; 酸式磷酸钾; 碱性磷酸酯酶;
英文同义词:AP; Alkaline Phosphatase

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)基因来源于 Antarctic Bacterium TAB 5,在大肠杆菌中异源表达,该酶能够催化 DNA 和 RNA 的 5′-或 3′- 磷酸单酯去磷酸化,也可以水解核糖、脱氧核糖核苷三磷酸(NTPs 和 dNTPs)。它作用于 5 ‘突出末端、5 ‘凹陷末端和平齐末端。

TAB 5 碱性磷酸酶可应用于许多分子生物学实验中如克隆或探针末端标记等,以用来去除 DNA 或  RNA 磷酸化的末端。在克隆实验中,去磷酸化后可以阻止线性化质粒 DNA 再自连接。它还可以用来降解 PCR 反应体系中残留的 dNTPs,以为 DNA 测序准备模板。TAB5 碱性磷酸酶在 70℃ 下加热  5 min 就会完全不可逆失活,所以在开始连接反应或末端标记实验之前无需对该酶进行去除操作。

产品储存:-25~-15℃储存,有效期2年(避免反复冻融)。

储存缓冲液:10 mM Tris-HCl (pH 7.4,25℃), 1 mMMgCl2, 0.01 mM ZnCl2,50% glycerol.

活性定义

在 37℃ 条件下,30 min 内能使1μg经 HindIII (产生 5′ 突出末端)、HincII (产生平齐末端)或 PstI (产生5’ 凹陷末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95%的DNA再环化(通过转化 E.coli 细胞来检测)。

蛋白分子量:TAB5 碱性磷酸酶的单体分子量为 35 kDa。

热失活:70℃,5 min。

质量控制

核酸外切酶活性:5 U 的本品和 1μgλ-HindIII digest DNA 在 37℃下反应 16  小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

核酸内切酶活性:5 U 的本品和1μg λ DNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA  的电泳谱带不发生变化;

切口酶活性:5 U 的本品和 1μg pBR322 在 37℃ 下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

RNase活性:5 U 的本品和 1.6μg MS2 RNA 在 37℃ 下反应 16 小时,RNA 的电泳谱带不发生变化;

大肠杆菌DNA残留检测:5 U 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 Taq Man qPCR 检测,E.coli 基因组残留≤0.1 pg/5 U。

细菌内毒素(Endotoxin):LAL-Test,中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法通则(1143),细菌内毒素含量 ≤10 EU/mg。

Q:嘌呤核苷酸磷酸化酶是什么?

嘌呤核苷磷酸化酶purine nucleoside phosphorylase,简称PNP或PNPase,该酶是嘌呤补救合成合成途径的关键酶之一,广泛存在于原核和真核生物中。

Q:总胆汁酸(TBA)溶液是什么?

体检TBA——总胆汁酸 ,正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸(DCA)还有少量石胆酸(LCA)和微量熊脱氧胆酸(UDCA),合称总胆汁酸(TBA)。   总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸,然后被肝细胞分泌入胆汁,随胆汁至肠道后,在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸,有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。如此循环不息。这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害。

Q:总胆汁酸(TBA)是什么?

1、血清总胆汁酸(TBA)是肝脏分泌到胆汁中最多的有机酸,肝功能受损时,胆汁酸代谢发生了变化,血中TBA很易升高,因此TBA已被认为是肝实质性损伤的灵敏指标。可以作为判断肝胆系统正常与否的重要信息。正常值0-10u mol/L,你的化验值22.6是升高的,可以作为早期肝损害的反映,但是应该结合其他肝脏功能检查,经过系统检查后再定。2、白细胞计数正常参考值:(4~10)×109/L(4000~10000/mm3)增高主要是急性感染、严重组织损伤、大出血、中毒、恶性肿瘤及白血病等。正常血液中含有粒性、单核性和淋巴性三类白细胞。粒细胞又根据胞浆中含有的颗粒性质不同,分为嗜酸性、嗜碱性及中性粒细胞三种。

Q:总胆汁酸(TBA)检测试剂盒?

总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(循环酶法)由试剂1和试剂2组成,试剂1包括:硫代辅酶、Good’s缓冲液(pH9.2);试剂2包括:3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、还原性辅酶(NADH)。基本参数:空白吸光度(光径1.0cm,波长410nm)≤0.50;空白吸光度变化率:△A/min<0.04;分析灵敏度:在测量50μmol/L的被测物时,吸光度变化率应在0.01~0.31之间;线性范围 0~180μmol/L,r≥0.990;批内精密度 CV≤10%;批间差 R≤10%;准确度:相对偏差≤10%。

Q:硫代氧化型辅酶性状?

硫代氧化型辅酶性状:淡黄色或黄绿色粉末,溶于水:50mg/ml,溶液呈清澈黄色至暗黄绿色,用途:生化研究,诊断试剂原料,保存:-20℃。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶作用?

该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶的应用?

嘌呤核苷磷酸化酶在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。

Q:嘌呤核苷磷酸化酶分类?

嘌呤核苷磷酸化酶按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmophilusTH 6-2)PNP为三聚体,亚基分子量为30~32kDa,通常只接受肌苷、鸟苷为底物;某些微生物,如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌,会同时存在两种聚体PNP。

Q:α-L-岩藻糖苷酶是什么?

α-L-岩藻糖苷酶是一种溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体组织细胞、血液和体液中,参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。在原发性肝癌患者血清中增高,是原发性肝癌的标志物之一。

Q:α-L-岩藻糖苷酶临床意义?

α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高,它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。

α-L-岩藻糖苷酶临床意义:

降低:见于遗传性α-L-岩藻糖苷酶缺乏引起的岩藻糖积蓄病。

升高:见于原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、急性肝炎等。

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