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技术指标
外观:白色或微黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥150 U/mg 酶粉;过氧化氢酶:≤0.1%;蛋白酶:≤0.001%;肌酸酶:≤0.001%;ATP 酶:≤0.001%;
酶学性质
来源:微生物;分类:EC 3.5.2.10;分子量:29 kDa(SDS-PAGE);等电点:5.3;Km值:5.0×10-2 M(Creatinine),8.0×10-2 M(Creatine);抑制剂:Hg2+,Cu2+,Fe3+;最适pH:7.0-8.0;最适温度:65℃;pH稳定性:pH 5.5-10.0(25℃,16 h);热稳定性:65℃ 以下稳定(pH 8.0,30 min);稳定性:-25~-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性;保护剂:糖类以及 BSA。
用途:水解肌酐,用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。
活性测定方法
原理:Creatinine+H2O Creatinine amidohydrolase Creatine
酶活定义:单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化反应生成 1μmol 肌酸所需的酶量。
试剂准备
试剂I:0.3 M 磷酸钾缓冲液,pH 6.5。
试剂II:0.1 M 肌酐溶液(1.13 g 肌酐溶于 100mL UP 水中)。
试剂III:4%Na2CO3 溶液(4.0 g Na2CO3 溶于100mL UP 水中)。
试剂IV:2%α-萘酚溶液(2.0 gα- 萘酚溶于100 mL 99.5% 乙醇中)。
试剂V:1.2 g NaOH 和 3.2 g Na2CO3 溶于双蒸水中,定容至 100 mL。
试剂VI:0.05% 二乙酰溶液(0.05 mL 二乙酰加水定容至 100 mL)。
酶稀释液:5 mM Tris-HCl pH 8.0
操作步骤
1. 在5 mL 离心管中加入0.1 mL试剂I,0.8mL 试剂 II。
2. 37℃ 水浴 5 min。
3. 加入 0.1 mL 待测样品,37℃ 孵育 10 min。
4. 加入 2.0 mL 试剂 III 终止反应,取出置于冰上。
5. 在新的 5 mL 离心管中按顺序加入如下试剂:第 4 步的溶液 80μL;双蒸水 720μL;试剂 IV 400μL;试剂V 400μL;试剂VI 400μL
6. 25℃静置1 h后,加入2 mL 双蒸水稀释。
7. 用分光光度计在 525 nm 检测吸光度。
*用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb
活力计算
- 化学表达式
Vt:反应液总体积(1.0 mL);
Vs:酶液体积(0.1 mL);
t:反应时间(10 min);
df:稀释倍数;
C:酶浓度(mg/mL);
1.0:光路长度(cm);
0.0704:标准反应条件下,生色基团在 525nm 处毫摩尔吸光系数(cm2/μmol)。
肌氨酸氧化酶可以氧化肌氨酸成甘氨酸和甲醛。它和肌酐酶和肌酸酶一起用于肌酐酶法检测。本品仅供科研使用。
肌氨酸氧化酶简称SOX,是肌酐降解代谢途径中的第三个酶,能专一性地催化底物肌氨酸生成甘氨酸。肌氨酸氧化酶在临床诊断中有广泛的应用,通过肌氨酸氧化酶偶联肌酐酶、肌酸酶测定血清中肌酐的含量,是判断肾脏功能的一个重要参考指标,在医药领域具有良好的应用前景。
肌酐酶法是用肌酐酶催化肌酐后,据其水解物的测定来测定血肌酐值的方法。由于酶是在活细胞内产生的一种蛋白质,在细胞内或分泌到细胞外起同样的催化作用。酶是生物体进行新陈代谢必不可少的物质,虽然酶法成本高,但由于酶相对特异性好,目前多采用酶法测定血肌酐值。由于医院的不同、试剂的不同、测定仪器的不同,故测定血肌酐值参考值范围也不同。因此,检查血肌酐值的正常与否及其前后对照,要在同一个医院进行测定与比较。
目前对肾功能肌酐的检测,多采用肌酐酶法,测定值较可靠,肌酐偏高的原因很多,主要表现为肾功能损害、肾小球滤过率降低,较常见的原因有慢性肾炎、高血压肾病、糖尿病肾病、肾缺血、尿路梗阻、肝炎、感染、肿瘤、免疫系统疾病等。要到医院进行诊治,明确诊断后,进行有针对性的治疗,防止肾功能恶化。
目前肌酐酶法的测定主要有两种,一种是监测肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶变化的酶动力学测定,另一种为肌酐氨基水解酶偶联肌氨酸氧化酶和过氧化物酶发生ChemicalbookTrinder反应的酶动力学测定。其中,后者由于试剂价格相对较低,不受血氨和其他干扰物的影响,目前已有大量的商品试剂盒供应。
肌酐酶能将肌酐转化成肌酸。在临床检测上,它和肌酸酶、肌氨酸氧化酶一起用于肌酐酶法检测。
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肌酸脒基水解酶CR
售价:¥178
肌酸脒基水解酶CR分子式:48 kDa(SDS-PAGE)
CAS:37340-58-2
纯度:≥90% -
肌酸脒基水解酶CR-T
售价:¥150
肌酸脒基水解酶CR-T分子式:48 kDa(SDS-PAGE)
CAS:37340-58-2
纯度:≥90% -
肌氨酸氧化酶
售价:¥100
肌氨酸氧化酶分子式:45 kDa (SDS-PAGE)
CAS:9029-22-5
纯度:≥90% -
肌酐(Cre)检测试剂盒(酶法,抗羟)
售价:¥116
肌酐(Cre)检测试剂盒(酶法,抗羟)分子式:Crea-S
CAS:HOEM0702
纯度:90% -
肌酐检测试剂盒(酶法)
售价:¥81
肌酐检测试剂盒(酶法)分子式:
CAS:HOEM0706
纯度:90% -
尿酸酶(UA-T)
售价:¥600
尿酸酶(UA-T)分子式:C18H26N5O14P
CAS:9002-12-4
纯度:≥90% -
尿酸酶(UA-R)
售价:¥200
尿酸酶(UA-R)分子式:C18H26N5O14P
CAS:9002-12-4
纯度:≥90% -
胆固醇氧化酶
售价:¥164
胆固醇氧化酶分子式:C47H53NO15
CAS:9028-76-6
纯度:≥90%