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中文：肌酐酶
英文：CAH
CAS：9025-13-2
分子式：C9H7F3O
纯度：≥90%
货期：24h
货号：HH0106-01
规格：10ku
中文同义词：肌酐酶;肌酐水解酶;肌酸酐水解酶;肌酐酶/CAH;
英文同义词：CAH; C:C&B12; EC 3.5.2.10;
技术指标
外观：白色或微黄色无定型冻干粉末；蛋白纯度：≥90%；比活性：≥150 U/mg 酶粉；过氧化氢酶：≤0.1%；蛋白酶：≤0.001%；肌酸酶：≤0.001%；ATP 酶：≤0.001%；
酶学性质
来源：微生物；分类：EC 3.5.2.10；分子量：29 kDa(SDS-PAGE)；等电点：5.3；Km值：5.0×10-2 M(Creatinine)，8.0×10-2 M(Creatine)；抑制剂：Hg2+，Cu2+，Fe3+；最适pH：7.0-8.0；最适温度：65℃；pH稳定性：pH 5.5-10.0(25℃,16 h)；热稳定性：65℃ 以下稳定(pH 8.0,30 min)；稳定性：-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性；保护剂：糖类以及 BSA。
用途：水解肌酐，用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。
活性测定方法
原理：Creatinine+H2O Creatinine amidohydrolase Creatine
酶活定义：单位酶活定义为在下述条件下，每分钟催化反应生成 1μmol 肌酸所需的酶量。
试剂准备
试剂I：0.3 M 磷酸钾缓冲液，pH 6.5。
试剂II：0.1 M 肌酐溶液（1.13 g 肌酐溶于 100mL UP 水中）。
试剂III：4%Na2CO3 溶液（4.0 g Na2CO3 溶于100mL UP 水中）。
试剂IV：2%α-萘酚溶液（2.0 gα- 萘酚溶于100 mL 99.5% 乙醇中）。
试剂V：1.2 g NaOH 和 3.2 g Na2CO3 溶于双蒸水中，定容至 100 mL。
试剂VI：0.05% 二乙酰溶液（0.05 mL 二乙酰加水定容至 100 mL）。
酶稀释液：5 mM Tris-HCl pH 8.0
操作步骤
1. 在5 mL 离心管中加入0.1 mL试剂I，0.8mL 试剂 II。
2. 37℃ 水浴 5 min。
3. 加入 0.1 mL 待测样品，37℃ 孵育 10 min。
4. 加入 2.0 mL 试剂 III 终止反应，取出置于冰上。
5. 在新的 5 mL 离心管中按顺序加入如下试剂：第 4 步的溶液 80μL；双蒸水 720μL；试剂 IV 400μL；试剂V 400μL；试剂VI 400μL
6. 25℃静置1 h后，加入2 mL 双蒸水稀释。
7. 用分光光度计在 525 nm 检测吸光度。
*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb
活力计算
-
- 化学表达式
Vt：反应液总体积(1.0 mL)；
Vs：酶液体积(0.1 mL)；
t：反应时间(10 min)；
df：稀释倍数；
C：酶浓度(mg/mL)；
1.0：光路长度(cm)；
0.0704：标准反应条件下，生色基团在 525nm 处毫摩尔吸光系数(cm2/μmol)。
化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子(hM)，利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。
化学发光法是检测待测物含量的，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光法在痕量金属离子、各类无机化合物、有机化合物分析及生物领域都有广泛的应用。
化学发光免疫分析中常用的标记酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)，HRP的化学发光底物为鲁米诺或其衍生物；ALP的化学发光底物为AMPPD。
发光剂是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，根据上述发光特点可将发光剂分为荧光素、生物发光剂和化学发光剂三种。常用的化学发光剂有以三种，酶促反应的发光底物的发光剂，直接化学发光剂，电化学发光剂。
发光剂是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，根据上述发光特点可将发光剂分为荧光知素、生物发光剂和化学发光剂三种。常用的化学发光剂有以三种，酶促反应的发光底物的发光剂，直接化学发光剂，电道化学发光剂。发光剂是回指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，根据上述发光特点可将发光剂分为荧光素、生物发光剂和化学发光剂三种。常用的化学发光剂有以答三种，酶促反应的发光底物的发光剂，直接化学发光剂，电化学发光剂。
肌酐酶能将肌酐转化成肌酸。在临床检测上，它和肌酸酶、肌氨酸氧化酶一起用于肌酐酶法检测。
目前肌酐酶法的测定主要有两种，一种是监测肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶变化的酶动力学测定，另一种为肌酐氨基水解酶偶联肌氨酸氧化酶和过氧化物酶发生ChemicalbookTrinder反应的酶动力学测定。其中，后者由于试剂价格相对较低，不受血氨和其他干扰物的影响，目前已有大量的商品试剂盒供应。
目前对肾功能肌酐的检测,多采用肌酐酶法,测定值较可靠,肌酐偏高的原因很多,主要表现为肾功能损害、肾小球滤过率降低,较常见的原因有慢性肾炎、高血压肾病、糖尿病肾病、肾缺血、尿路梗阻、肝炎、感染、肿瘤、免疫系统疾病等。要到医院进行诊治,明确诊断后,进行有针对性的治疗,防止肾功能恶化。
肌酐酶法是用肌酐酶催化肌酐后，据其水解物的测定来测定血肌酐值的方法。由于酶是在活细胞内产生的一种蛋白质，在细胞内或分泌到细胞外起同样的催化作用。酶是生物体进行新陈代谢必不可少的物质，虽然酶法成本高，但由于酶相对特异性好，目前多采用酶法测定血肌酐值。由于医院的不同、试剂的不同、测定仪器的不同，故测定血肌酐值参考值范围也不同。因此，检查血肌酐值的正常与否及其前后对照，要在同一个医院进行测定与比较。
肌酸酶是催化肌酸水解的同型二聚体。它由两个单体亚基和两个定义的结构域（N末端域和C末端域）组成。C末端折叠在两个结构相似的域内具有α螺旋和反平行β片。在这两个结构域之间，有一个巯基充当活性位点，并且活性与金属无关。
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