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技术指标
外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度: ≥90%; 比活性:≥8 U/mg 酶粉;过氧化氢酶:≤0.001%; 胆固醇酯酶:≤0.01%; 葡萄糖氧化酶:≤0.01%; ATP酶: ≤0.005%
酶学性质
来源:微生物;分类:EC 1.1.3.6; 分子量:60 kDa(SDS-PAGE); 等电点:5.6; Km值:3.3×10-4 M(Cholesterol); 抑制剂:SDS,Ag+,Zn2+,Hg2+; 最适pH: 7.0;最适温度: 50℃; pH稳定性: 5.5-10(25℃,16 h); 热稳定性: 40℃ 以下稳定(pH 7.0,30 min);稳定性: -25~-15℃ 静置保存 12 个月保持90% 以上活性;保护剂: BSA 以及非离子型表面活性剂.
用途: 用于高、低密度脂蛋白胆固醇试剂的研发和大量配制。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化生成 1μmol H2O2 所需的酶量。
试剂准备
试剂I:0.1 M磷酸钾缓冲液,pH 6.5。
试剂II:在500ml烧杯中加入5 mL Triton
X-100 和 0.5 g 胆固醇,用保鲜膜密封,用微波炉加热至胆固醇完全溶解。缓慢加入 90 mL 双蒸水,加热并使其沸腾 30-60s,溶液将变浑浊。用自来水淋洗使溶液冷却,冷却后的溶液会变澄清,若冷却后未变澄清则需要重新加热使其完全溶解。在澄清的溶液中加入 0.4 g 胆酸钠,用双蒸水定容至100 mL。定容后用 0.22um 滤膜过滤,此溶液在室温下一周内稳定。如果该溶液变浑浊,可轻微加热使其澄清。试剂III:纯水配制 100 U/mL POD。
试剂IV:50 mM 4-AA 溶液(1.016 g 4-AA溶于100 mL UP水)。
试剂V:50 mM TOOS 溶液(1.477 g TOOS溶于100 mL UP水)。
酶稀释液:20 mM 磷酸钾缓冲液,pH 7.0,含0.2%BSA。
样品:用酶稀释液将酶稀释至 0.05-0.2U/mL。
按如下配制反应混合物:
试剂I: 53 mL; 试剂II:7 mL; 试剂III:5 mL; 试剂IV:3 mL; 试剂V:3 mL; 双蒸水:19 mL; 共90 mL,可用于100次反应
操作步骤
1. 将反应混合物置于 37℃ 水浴锅预热;
2. 向1 mL比色皿中加入 0.9 mL 反应混合物。
3. 向反应混合物中加入 0.1 mL 待测酶液,混匀。
4. 37℃反应,用分光光度计在 555 nm 检测样品1 min内的吸光度变化(ΔAs)
*用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb
胆固醇酯酶(EC3.1.1.13)属于酯酶的一种,可以催化胆固醇酯水解为胆固醇和脂肪酸,临床诊断中与胆固醇氧化酶共同作用测定血浆总胆固醇含量,是医学上检测和预防心脑血管疾病的重要参考指标。
胆固醇氧化酶对胆固醇的催化作用有两步:氧化和异构化,首先胆固醇氧化酶将胆固醇3位上的羟基氧化生成羰基.即中间产Chemicalbook物五烯三酮,然后将5位上的烯烃双键异构成4位上的烯烃双键,即终产物胆甾烯酮,同时将脱下的氢与氧气生成H202。
胆固醇氧化酶在食品工业、制药工业和生物农业中都有广泛的用途。随着我国人口老龄化的进程加快,人体中由胆固醇偏高引起的老年性疾病不断增多,愈来愈要求对肉制Chemicalbook品、奶制品中的胆固醇进行处理以降低含量,市场需求也在100吨左右。胆固醇氧化酶在食品中应用的推广,可以改善食品质量,优化膳食结构,保证人民的身体健康。
胆固醇氧化酶在制药工业和生物农业中都有广泛的用途,用途为:1.胆固醇氧化酶应用于检测血清或食品中胆固醇含量,与胆固醇脂酶复配,就可以制造临床诊断试剂盒,具有较大的应用市场。2.胆固醇氧化酶可以降解食Chemicalbook品中的胆固醇,在降低胆固醇的同时产生胆甾―4一烯―3―酮,这可以替代化学法和物理法生产低胆固醇保健食品。3.胆固醇氧化酶可以破坏内消化道上皮细胞,抑制昆虫生长发育,是一种有效的杀灭鳞翅目昆虫的杀虫剂。
胆固醇氧化酶临床上常用于测量体内所含胆固醇多少的一种方法,对于指导临床治疗具有非常重要的意义,如果胆固醇出现偏低的情况则可以适当增加营养的摄入。多食用一些胆固醇含量高的食物,比如动物内脏、动物的脑以及蛋黄等,有助于胆固醇升高。如果是胆固醇偏高的患者则应当积极服用一些他汀类药物进行治疗,有助于胆固醇的降低,同时可以适当增加纤维素含量高的食物的摄入比如绿色蔬菜以及水果等。
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肌酐酶
售价:¥47
肌酐酶分子式:C9H7F3O
CAS:9025-13-2
纯度:≥90% -
肌酸脒基水解酶CR
售价:¥178
肌酸脒基水解酶CR分子式:48 kDa(SDS-PAGE)
CAS:37340-58-2
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肌酸脒基水解酶CR-T
售价:¥150
肌酸脒基水解酶CR-T分子式:48 kDa(SDS-PAGE)
CAS:37340-58-2
纯度:≥90% -
肌氨酸氧化酶
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肌氨酸氧化酶分子式:45 kDa (SDS-PAGE)
CAS:9029-22-5
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肌酐(Cre)检测试剂盒(酶法,抗羟)
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尿酸酶(UA-T)
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尿酸酶(UA-T)分子式:C18H26N5O14P
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尿酸酶(UA-R)
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尿酸酶(UA-R)分子式:C18H26N5O14P
CAS:9002-12-4
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