碱性磷酸酶

核酸外切酶活性：5U的本品和1μgλ-HindIIIdigestDNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化；

核酸内切酶活性：5U的本品和1μgλDNA,在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化；

碱性磷酸酶切口酶活性：5U的本品和1μgpBR322在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化；RNase活性：5U的本品和1.6μgMS2RNA

在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化；

大肠杆菌DNA残留检测：5U本品中残留的核酸经E.coli16srDNA特异性的TaqMan qPCR检测，E.coli基因组残留≤0.1pg/5U。

细菌内毒素（Endotoxin）：LAL-Test，中国药典2020版第四部凝胶限度试验法通则（1143），细菌内毒素含量≤10EU/mg。

1.碱性磷酸酶反应体系可以根据实验需要按比例进行放大或缩小；

2.本酶为同源二聚体，它的单体分子量为35kDa；

3.本酶是一种依赖于Zn2+或Mg2+的酶，所以在反应过程中需要添加Zn2+；

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

碱性磷酸酶在37℃条件下，30min内能使1μg经HindIII(产生5’突出末端)、HincII(产生平齐末端)或PstI(产生5’凹陷末端)消化的pUC19DNA去磷酸化所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制>95%的DNA再环化(通过转化E.coli细胞来检测)。

碱性磷酸酶（AlkalinePhosphatase）基因来源于AntarcticBacteriumTAB5，在大肠杆菌中异源表达，该酶能够催化DNA和RNA的5′-或3′-磷酸单酯去磷酸化，也可以水解核糖、脱氧核糖核苷三磷酸(NTPs和dNTPs)。它作用于5’突出末端、5’凹陷末端和平齐末端。

TAB5碱性磷酸酶可应用于许多分子生物学实验中如克隆或探针末端标记等，以用来去除DNA或RNA磷酸化的末端。在克隆实验中，去磷酸化后可以阻止线性化质粒DNA再自连接。它还可以用来降解PCR反应体系中残留的dNTPs，以为DNA测序准备模板。

TAB5碱性磷酸酶在70℃下加热5min就会完全不可逆失活，所以在开始连接反应或末端标记实验之前无需对该酶进行去除操作。

碱性磷酸酶高一般是指碱性磷酸酶检查中碱性磷酸酶的值高于正常参考值范围。碱性磷酸酶高的正常参考值为：女性的正常参考值是50～135U/L，男性的是45～125U/L。碱性磷酸酶广泛存在于人体各器官组织中，以肝脏细胞中最多，许多人对碱性磷酸酶陌生。平时到医院临床进行肝功能检查时，结果中会包含碱性磷酸酶（ALP或AKP）这项，部分人会出现碱性磷酸酶偏高的现象。

碱性磷酸酶偏低是指检测的碱性磷酸酶的值低于碱性磷酸酶的参考正常值范围。碱性磷酸酶的正常范围值是：女性，1-12岁小于500U/L；大于15岁，40-150U/L；男性，1-12岁小于500U/L；12-15岁，小于750U/L；大于15岁，40-150U/L。如果低于碱性磷酸酶的正常范围即为碱性磷酸酶偏低。碱性磷酸酶广泛分布与人体的各种器官中，其中以肝脏最多。

血清碱性磷酸酶英文名称：ALP。血清碱性磷酸酶是骨骼、肝胆、小肠、肾、肺等产生的同工酶。正常人血清中的碱性磷酸酶主要来自骨骼，由成骨细胞产生。ALP经肝胆系统进行排泄。所以当AKP产生过多或排泄受阻时，均可使血中AKP发生变化。临床上常借助ALP的动态观察来判断病情发展，预后和临床疗效。正常人血清中的碱性磷酸酶主要来自肝和骨骼，碱性磷酸酶测定主要用于诊断肝胆和骨骼系统疾病，是反映肝外胆道梗阻、肝内占位性病变和佝偻病的重要指标。正常人血清中的碱性磷酸酶主要来自肝和骨骼，碱性磷酸酶测定主要用于诊断肝胆和骨骼系统疾病，是反映肝外胆道梗阻、肝内占位性病变和佝偻病的重要指标。

1、各种肝内、肝外、胆管堵塞性疾病，如胰头癌、胆道结石引起的胆管堵塞、原发性胆汁性肝硬化、肝内胆汁堵塞等，碱性磷酸酶明显上升，与血清胆红素上升平行；2、同时测定体内碱性磷酸酶和血清胆红素，可鉴定黄疸；3、骨骼疾病如：各种骨科炎症和疾病、成骨细胞瘤、骨折愈合期碱性磷酸酶升高，主要用于变形性骨炎、原发性甲状腺机能亢进、骨软化症和佝偻病的诊断；4、生长过程中儿童孕晚期碱性磷酸酶可生理性提高。