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肽N-糖苷酶F (快速版)

英文名称:PNGase F(Fast)
CAS:83534-39-8
货号: HH6902
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中文:肽N-糖苷酶F (快速版)
英文:PNGase F(Fast)
CAS:83534-39-8
分子式:EC 3.5.1.52
纯度:≥95%
货期:24h
货号:HH6902
规格:50ul
中文同义词:N-糖酰胺酶,肽N-糖苷酶,N-糖苷酶 F
英文同义词:PNGase F from Elizabethkingia miricola,Rapid peptide N- glycosides F

产品描述

PNGase F 是从糖蛋白中去除几乎所有N-糖链的最有效的方法。PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的N-连接糖链。切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖;切割位点为:最内侧的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键。

技术指标

外观:无色液体;蛋白纯度: ≥95%(SDS-PAGE);比活性: ≥500,000 U/mL

酶学性质

来源:微生物;分类: EC 3.5.1.52;分子量; 35 kDa(SDS-PAGE); 等电点:8.14; 最适pH:7.0-8.0;最适温度: 65℃; 底物选择性水解蛋白质的 Asn  相连的 N- 糖链,使N-聚糖保持完整。糖蛋白水解位点除含 α1-3岩藻糖苷键外,能切割所有N-糖链。激活剂: DTT; 抑制剂:SDS; 储存温度: -25~-15°C; 失活条件:含1μL PNGase F 的 20μL 反应混合物在 75°C 孵育1 0min 即可失活。

用途:用于从糖蛋白中去除 N- 糖链。

酶活定义: 单位酶活定义为在下述条件下,10μL 的反应体系中,37°C 反应 1 小时从 10μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。

操作步骤

1.用去离子水溶解 1-20μg 的糖蛋白,加入 1μL 的 10×Glycoprotein DenaturingBuffer,用去离子水定容到 10μL;

2.100°C 孵育 10 min;

3.加入2μL 的 10×GlycoBuffer 2,2μL 的 10% NP -40,轻轻吹打混匀;

4.加入 1-2μL 的 PNGase F,加去离子水到 20μL,轻轻吹打混匀;

5.37°C 孵育 60 min;

6.用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。

Q:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶生产方法?

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶以酵母为原料,EDTA抽提后,DEAE纤维柱层析除核酸,再经磷酸纤维素层析、CM-Sephadex层析,最后结晶得产品。

Q:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶简介?

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(英语:glucose-6-phosphatedehydrogenase,EC1.1.1.49)是一种以NAD+或NADP+为受体、作用于供体CH-OH基团上的氧化还原酶。这种酶能催化以下酶促反应:葡萄糖-6-Chemicalbook磷酸脱氢酶主要参与磷酸戊糖途径,也能缓慢地作用在β-D-葡萄糖等其他糖类上。这种酶可由其底物葡萄糖-6-磷酸激活,如果人类表达葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的基因G6PD有缺陷,将会导致葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症,引发非免疫性溶血性贫血。

Q:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶症是什么病?

葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏症,是临床上一种溶血性疾病,主要是一种遗传性溶血性疾病,临床上主要表现为溶血性贫血的临床症状,例如贫血,黄疸等。有的在进食蚕豆后可以诱发溶血性贫血,有的在某些药物,例如非甾体类抗炎药,磺胺类药物等诱发溶血性贫血。因此,葡萄糖六磷酸脱氢酶缺乏的患者,禁忌进食蚕豆以及某些导致溶血的药物。

Q:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶是什么?

G-6-PD来源于红细胞,催化葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,生成的NAD-PH是谷胱甘肽还原酶的辅酶,还原型谷胱甘肽(GSH)是保持血红蛋白稳定性及红细胞膜完整性的必要条件。红细胞G-6-PD缺乏者,红细胞膜失去巯基保护而功能受损,终致溶血。G-6-PD缺乏(陷)基因在X染色体上,通过女性遗传,男性患者居多。

Q:酸性神经鞘磷脂酶的生物学特性及其功能?

神经鞘磷脂酶(sphingomyelinase,SMase)是一种可以作用于鞘磷脂(sphingomyelin,SM)的水解酶。SMase可以水解质膜表面鞘磷脂的磷酸二酯键,产生神经酰胺(ceramide)和磷酸胆碱。当前,人们对SMase的分泌机制尚不清楚,细胞可能是通过自分泌或旁分泌方式将SMase释放到细胞表面,并水解细胞表面的SM,再进一步启动初始信号的转导。

Q:己糖激酶是什么?

己糖激酶(hexokinase,HK)是一种转移酶,专一性不强,受葡萄糖-6-磷酸和ADP的抑制,Km(米氏常数)小、亲和性强,可以针对多种六碳糖进行作用。

Q:己糖激酶的反应过程?

己糖激酶为催化己糖6位上由ATP使之产生磷酸化反应的酶。EC2.7.1.1。其反应过程是:己糖ATP→己糖-6-磷酸ADP,对α-D葡萄糖的亲和性很高(Km=1×10-5M),对其他的己糖也可进行磷酸化。此反应的平衡向右偏移。△G°’=4.0千卡。该酶广泛存在于以糖为能源的细胞,但在酵母、肝脏、肌肉、脑等最多。该酶可被结晶化。分子量约为9万6千(酵母己糖激酶)。可被Mg2、K所活化,但可被HS试剂阻抑。动物的己糖激酶是作为同功酶而存在的。

Q:己糖激酶特性及参数说明?

己糖激酶目前已知有4种不同的型态,这些型态差异是来自相同基因的选择性剪接,也就是将基因上的外显子(由内含子隔开的部分)重新组合。此外在不同类型的细胞中,也有许多功能或结构与己糖激酶相似的酵素,包括己糖激酶I、己糖激酶II、己糖激酶III,以及与前三者差异较大的己糖激酶IV(又称为葡萄糖激酶)。这类酵素称为同工酶,它们拥有相同的作用,但是却是由不同的基因所制造。

Q:己糖激酶特性及参数说明?

己糖激酶以两种不同的形式从酵母细胞中分离出来,称为PI和P-II。这些是独立的、不可相互转化的同工酶

己糖激酶用于测定葡萄糖、果糖、甘露糖和ATP。

来自酵母的己糖激酶的特性:分子量:天然形式的分子量约为100,000,由分子量略高于50,000的多肽链组成。

最佳pH值:7.5-9.0。

组成:PI和P-II都含有相同的氨基末端缬氨酸和相同的羧基末端丙氨酸。Schmidt等人已经报道了氨基酸组成。(1973b)。

Q:己糖激酶的制备方法?

己糖激酶(Hexokinase)是生物体呼吸代谢过程中的关键酶之一,具有催化己糖磷酸化的作用。己糖激酶存在于所有细胞中,是细胞产生能量所需要的一种酶,共有 5 种亚型,其中 I 和 II 分布在线粒体外膜,与电压依赖性阳离子通道蛋白结合;这种部位让己糖激酶能直接获得线粒体产生的 ATP,ATP是己糖激酶的底物之一。

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