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CHO 残留 DNA 检测试剂盒
英文名称：CHO DNA assay Kit
货号：
HBP003303
产品价格：请联系客服
选择规格：
100 Test
商品总价：请联系客服
*具体价格和货期请咨询业务员
中文：CHO 残留 DNA 检测试剂盒
英文：CHO DNA assay Kit
纯度：≥90%
货期：24h
货号：HBP003303
规格：100 Test
中文同义词：CHO 残留 DNA 检测试剂盒 (PCR-荧光探针法)
英文同义词：CHO DNA assay Kit
规格
| 货号 | 规格 |
|---|---|
| HBP003303 | 100 reactions |
预期用途
本试剂盒利用 TaqMan 荧光探针的 qPCR 检测原理对重组蛋白、抗体、疫苗等生物制品中CHO 细胞残留 DNA 进行定量测定，检测快速，专一性强。仅供研究使用，不可用于临床。本检测方法可溯源至中国药典方法，通则<3407>。
试剂盒组成
| 名称 | 规格 | 支数 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| CHO DNA Positive Control | 30ng/μL 50μL/μL | 1 | -25℃~-15℃ |
| Compound of primers and probes | 0.5mL | 1 | -25℃~-15℃，避光 |
| qPCR Master Mix | 1.5mL | 1 | -25℃~-15℃，避光 |
| DNA Dilution Buffer | 1.5mL | 1 | -25℃~-15℃ |
储存条件及有效期
- 有效期：规定储存条件下 24 个月。
- 运 输 和 储 存 ： 长 时 间 储 存 请 放 置 在 -25~-15℃ ，运输过程中请放置在干冰或冰 袋中。
CHO DNA 阳性对照标准曲线样品的 制备
CHO DNA 阳性对照品浓度标注于管壁标签上，确认实际浓度后再进行稀释。用试剂盒中提供的DNA稀释液将CHO DNA阳性对照品进行梯度稀释，稀释浓度依次为3000pg/μL、300pg/μL、30pg/μL、3pg/μL、0.3pg/μL、0.03pg/μL、0.003pg/μL。
具体操作如下：
- 将试剂盒中的 CHO DNA 阳性对照品和DNA 稀释液从-20℃取出后置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，快速离心 2~5秒。
- 取 7 支低吸附离心管，分别标记为 ST0、ST1、ST2、ST3、ST4、ST5 和 ST6。按下表准备 CHO DNA 标准样品，每步稀释后各管均用旋涡混合器混匀，快速离心 2~5 秒，再进行下一个梯度稀释，标准样品稀释完后2~8℃保存，现配现用。
CHO DNA 阳性对照品的稀释
| 稀释管 | 稀释步骤 | 浓度（pg/μL |
|---|---|---|
| ST0 | 10μL DNA 阳性对照品 + 90μL DNA 稀释液 | 3000 |
| ST1 | 10μL ST0 + 90μL DNA 稀释液 | 300 |
| ST2 | 10μL ST1 + 90μL DNA 稀释液 | 30 |
| ST3 | 10μL ST2 + 90μL DNA 稀释液 | 3 |
| ST4 | 0μL ST3 + 90μL DNA 稀释液 | 0.3 |
| ST5 | 10μL ST4 + 90μL DNA 稀释液 | 0.03 |
| ST6 | 10μL ST5 + 90μL DNA 稀释液 | 0.003 |
已融化未使用的 DNA 稀释液可暂存于 2-8℃
加样回收质控 ERC 的制备
根据需要设置 ERC 中的 CHO DNA 加标量 （建议加标量设定为其样品历史无加标测试值的 2~30 倍），以制备加 30pg CHO DNA量的供试品 ERC 为例，
具体操作如下：
- 取100μL供试品加入1.5mL低吸附离心管中。
- 加入 10μL ST3，混匀，标记为供试品 ERC。
- 样本 ERC 与同批供试品一起进行前处理，制备成供试品 ERC 纯化液。
阴性质控 NCS 的制备
根据实验设置阴性质控，
具体操作如下：
- 取 100μL 供试品基质溶液（或 DNA 稀释液）加入 1.5mL 低吸附离心管中标记为阴性质控 NCS。阴性质控 NCS 和同批供试品一起进行前处理，制备成阴性质控 NCS 纯化液。
qPCR 反应体系
1.根据所要检测的标准曲线及待测样本数量，计算所需反应孔数。反应孔数=（6 个浓度梯度的标准曲线样品
+1 个空白对照 BLK+1 个阴性质控 NCS+供试品+供试品 ERC）×3；
2.根据反应孔数计算本次所需的反应混合液的总量：反应混合液总量=（反应孔数+2）×（15μL qPCR Master Mix + 5μL Compound of primers and probes）（含有 2 孔的加样误差损失量）
3.各试剂置于室温融化后，根据上一步所计算的引物与 Mix 的量配置所需要的反应混合液，轻微振荡混匀，然后按下表所示加样
嘌呤核苷磷酸化酶purine nucleoside phosphorylase，简称PNP或PNPase，该酶是嘌呤补救合成合成途径的关键酶之一，广泛存在于原核和真核生物中。
体检TBA——总胆汁酸 ，正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸（CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸（DCA)还有少量石胆酸（LCA）和微量熊脱氧胆酸(UDCA)，合称总胆汁酸(TBA)。 总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸，然后被肝细胞分泌入胆汁，随胆汁至肠道后，在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸，有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。如此循环不息。这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害。
1、血清总胆汁酸（TBA）是肝脏分泌到胆汁中最多的有机酸，肝功能受损时，胆汁酸代谢发生了变化，血中TBA很易升高，因此TBA已被认为是肝实质性损伤的灵敏指标。可以作为判断肝胆系统正常与否的重要信息。正常值0－10u mol/L，你的化验值22.6是升高的，可以作为早期肝损害的反映，但是应该结合其他肝脏功能检查，经过系统检查后再定。2、白细胞计数正常参考值：(4～10)×109/L(4000～10000/mm3)增高主要是急性感染、严重组织损伤、大出血、中毒、恶性肿瘤及白血病等。正常血液中含有粒性、单核性和淋巴性三类白细胞。粒细胞又根据胞浆中含有的颗粒性质不同，分为嗜酸性、嗜碱性及中性粒细胞三种。
总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(循环酶法)由试剂1和试剂2组成，试剂1包括：硫代辅酶、Good’s缓冲液(pH9.2)；试剂2包括：3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)、还原性辅酶(NADH)。基本参数：空白吸光度(光径1.0cm，波长410nm)≤0.50；空白吸光度变化率：△A/min＜0.04；分析灵敏度：在测量50μmol/L的被测物时，吸光度变化率应在0.01～0.31之间；线性范围 0~180μmol/L，r≥0.990；批内精密度 CV≤10%；批间差 R≤10%；准确度:相对偏差≤10%。
硫代氧化型辅酶性状：淡黄色或黄绿色粉末，溶于水：50mg/ml，溶液呈清澈黄色至暗黄绿色，用途：生化研究，诊断试剂原料，保存：-20℃。
该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应，将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。
嘌呤核苷磷酸化酶在体外反应时，若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物，可以合成新的嘌呤核苷或类似物，现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物，如阿糖腺苷、利巴韦林等。
嘌呤核苷磷酸化酶按照PNP底物专一性和分子量大小，可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体，亚基分子量为25kDa，底物专一性不强，能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物；哺乳动物和部分微生物（Bacillus cereus、Bacillus stearothmophilusTH 6-2）PNP为三聚体，亚基分子量为30~32kDa，通常只接受肌苷、鸟苷为底物；某些微生物，如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌，会同时存在两种聚体PNP。
α-L-岩藻糖苷酶是一种溶酶体酸性水解酶，广泛存在于人体组织细胞、血液和体液中，参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。在原发性肝癌患者血清中增高，是原发性肝癌的标志物之一。
α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高，它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。
α-L-岩藻糖苷酶临床意义：
降低：见于遗传性α-L-岩藻糖苷酶缺乏引起的岩藻糖积蓄病。
升高：见于原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、急性肝炎等。
