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技术指标
外观:白色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥150 U/mg 酶粉;NADH/NADPH 氧化酶:≤0.1%;己糖激酶:≤0.001%;谷胱甘肽还原酶:≤0.001%;磷酸葡萄糖异构酶 ≤0.001%。
酶学性质
来源:微生物;分类:EC 1.1.1.49;分子量:57 kDa(SDS-PAGE);等电点:4.6;Km值:3.2×10-4M(NAD+);2.6×10-4 M(G-6-P);抑制剂SDS,Zn2+,Fe3+;最适pH 8.0。
最适温度:45℃;pH稳定性 5.5-10.0(25℃,16 h);热稳定性 40℃以下稳定 (pH 7.5,30 min);稳定性:-25~-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性;保护剂:BSA。
用途:用于 CKMB,CK 等试剂的研发和大量配制。
酶活定义
单位酶活定义为在下述反应条件下每分钟生成 1μmol NADH 所需的酶量。
试剂准备
试剂I:55 mM Tris-HCl,pH 7.8,含 3.3 mMMgCl2。
试剂II:60 mM NAD+ 溶液。
试剂III:0.1 M D- 葡萄糖-6-磷酸-二钠。
酶稀释液:5 mM,pH 7.5 Tris HCl,含0.1%BSA。
操作步骤
1.分别取2.7 mL 试剂I、0.1 mL 试剂II 和 0.1mL 试剂III,混匀并在37℃预热5min。
2.加入0.1 mL 待测酶液,混匀。
3.37℃ 反应,用分光光度计在 340 nm 检测样品 1 min 内的吸光度变化(ΔAs)。
*用酶稀释液替换待测酶液,其它步骤相同,记录空白的吸光度变化(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb
LDL是富含胆固醇的脂蛋白,其胆固醇主要来自从CE转运的高密度脂蛋白中的胆固醇。目前认为血浆中LDL的来源有两条途径:①主要途径是由VLDL异化代谢转变而来;②次要途径是肝合成后直接分泌到血液中。LDL的降解是经LDL受体途径进行代谢,细胞膜表面的被覆陷窝是LDL受体存在部位,即LDL中的ApoB100被受体识别,将LDL结合到受体上陷窝内,其后再与膜分离形成内吞泡,在内吞泡内经膜H+-ATPase作用,pH降低变酸,LDL与受体分离并与溶酶体融合后,再经酶水解产生胆固醇进入运输小泡体,或者又经ACAT作用再酯化而蓄积。
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 检测试剂盒
低密度脂蛋白(LDL)是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来。主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞,运输到肝脏合成胆酸。每种脂蛋白都携带有一定的胆固醇,携带胆固醇最多的脂蛋白是LDL。体内2/3的LDL是通过受体介导途径吸收入肝和肝外组织,经代谢而清除的。余下的三分之一是通过一条“清扫者”通路而被清除的,在这一非受体通路中,巨噬细胞与LDL结合,吸收LDL中的胆固醇,这样胆固醇就留在细胞内,变成“泡沫”细胞。因此,LDL能够进人动脉壁细胞,并带人胆固醇。LDL水平过高能致动脉粥样硬化,使个体处于易患冠心病的危险。
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 检测试剂盒
低密度脂蛋白胆固醇在血管内由极低密度脂蛋白转化而来,极低密度脂蛋白主要是由甘油三酯、胆固醇,磷脂组成,其中甘油三酯占60%。低密度脂蛋白在肝脏内代谢。1.低密度脂蛋白胆固醇=低密度脂蛋白+胆固醇,是一种结合体,是把肝脏合成的胆固醇运送出去。2.如果运送出去的低密度脂蛋白胆固醇过多,人体利用不了,就会沉积在动脉血管壁上,引起炎症反应,伤害血管内皮。
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 检测试剂盒
低密度脂蛋白胆固醇偏高对人体有一定害处,主要是可以造成动脉粥样硬化,引起冠心病、心肌梗死的发生。低密度脂蛋白胆固醇偏高主要与饮食、不良生活习惯有关,如长期摄入肥肉、炸鸡等脂肪含量较高的食物,油脂过高使低密度脂蛋白胆固醇的合成增加。机体存在某些疾病时,如肝炎、肝癌的患者,肝脏功能受损,影响低密度脂蛋白胆固醇的降解、代谢,也会导致低密度脂蛋白胆固醇偏高。
高密度脂蛋白胆固醇(HDL):从周围组织得到胆固醇并在卵磷脂胆固醇转移酶的作用下专变成胆固醇脂后,直接将其运送到肝,再进一步代谢,起到清除周围组织胆固醇的作用,并进而预防动脉粥样硬化的形成,此过程称胆固醇“逆向转运”途径。HDL-C水平降低对冠心病是一个有意义的独立危险因素,而HDL-C升高则可以预防冠心病的发生。
甘油激酶(GlycerolKinase,EC2.7.1.30)是一种广泛存在的酶,可以从不同来源的生物组织中提取得到,目前主要是从大肠杆菌和嗜热脂肪芽胞杆菌中发酵生产.甘油激酶是利用甘油代谢的限速酶.甘油激酶是酶法测定血液中甘油三酯的关键酶之一。
由化石燃料的过度消耗而引起的温室效应等环境问题,促进了可再生能源——生物燃料的发展,甘油激酶微藻生物柴油作为一种非常有潜力代替化石能源的新型燃料[1-2],因其具有绿色环保等优势,成为现在研究的热点.三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)是一种生长快、油脂含量高的海洋模式硅藻。
在脂肪细胞中,因为没有甘油激酶,所以不能利用脂肪分解产生的甘油,只有通过血液循环运输至肝、肾、肠等组织利用。在甘油激酶(glycerokinase)作用下,转变为3Chemicalbook-磷酸甘油,然后脱氢生成磷酸二羟丙酮,再循糖代谢途径进行氧化分解释放能量,也可在肝沿糖异生途径转变为葡萄糖或糖原。甘油在甘油磷酸激酶的催化下,磷酸化为3-磷酸甘油。
甘油激酶(Glycerol kinase)活性酶连续反应光谱法定量检测试剂是一种旨在使用甘油激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光谱法测定样品中酶活性的*而经典的技术方法。
甘油激酶(glycerol kinase;GK;EC2.7.1.30),又称为ATP甘油-3-磷酸转移酶(ATP:glycerol 3-phospho transferase),广泛存在于生物界。甘油激酶催化由ATP提供的磷酸基团,转移到甘油分子上的反应,产生磷酸甘油。哺乳动物中,甘油激酶参与糖和脂类代谢的交接部位的反应
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