知否？知否？应是酶制剂说明书要点解读

面对繁重而艰巨的研发任务，如何才能改良试剂的配方？如何选择合适的原料？如何让原料发挥最大的功效？

如果你学会正确阅读酶原料的说明书，也许这些难题都会迎刃而解。

第一步，验明正身。通过看产品名称、反应原理，可以大致确认酶制剂是否符合检测实验的选型要求。

比如“葡萄糖脱氢酶（FAD依赖型）”这个产品名称告诉我们，这个酶能催化的底物是葡萄糖，催化的是氧化反应（脱氢反应），反应需要依赖FAD这个辅因子。

从反应方程式中可看出该酶催化的原理，可以判断开发试剂时应选用的检测方法。比如反应产生或消耗NADH，那么可以在340nm波长下进行检测；反应产生双氧水，那后续都会偶联Trinder反应进行显色。

确认过眼神，你是对的人。错了，这里应该是“酶”。

经过第一轮的初筛，缩小了候选范围，接下来就可以比较真正的技术了。即使都叫着同一个名字，酶分子也有不同的来源、不同的生产工艺，从而带来了不同的性质。这些性质体现在产品的外观、纯度、比活力、最适pH、最适反应温度、热稳定性、Km值、等电点、抑制剂等方面。如何挑选到最适合检测反应体系的酶制剂？如何让酶制剂在检测反应体系里发挥最大的效用？这都可以在说明书里找到答案。

体外诊断试剂在注册时，都会标明液体试剂的颜色。酶制剂的颜色在投料后会影响到试剂的颜色；比如COX、FPOX、SOX等都是淡黄色或黄色粉末，其配制的试剂也大多为淡黄色或黄色。选择外观颜色和注册信息接近的酶制剂就很重要。另外在实际生产过程中，酶制剂送到生产人员手中时都是一堆粉末，当很多种不同的粉末被送到生产人员手中时，投料错误的情况就有可能会发生，一旦出现这种情况，就意味着几万甚至几十万的物料损失。除了在投料前仔细核对包装信息之外，核对酶制剂粉末的外观是否和说明书的描述一致，也可以成为避免损失的一道屏障。

在计算投料量时，比活力是必须了解的参数，进行换算后才能确定投料量。另外比活力也是比较酶制剂的一个重要参数，酶制剂本身是蛋白质粉末，可以作为微生物生长的养料，这就会引入污染。选择比活力高的酶制剂可以减少投料量，减少微生物污染的问题，增加诊断试剂产品的保质期，提升产品品质。

人有自己的舒适区间，不喜欢严寒，不喜欢酷暑，喜欢在清新的空气里自由呼吸。酶制剂也一样，每种酶制剂都有自己的最适区间，在一定的pH值和温度下，酶制剂才可以被激发出最大的催化活力。从说明书上找到最适pH值，然后将试剂的pH值设定在这个范围内，就能让酶分子以最好的状态工作。最适温度可以成为比较选择酶制剂的一个参考，最适温度比较高的酶，稳定性也更好，选择这样的酶制剂可以增加诊断试剂本身的稳定性。

除此之外，还有一对与pH值和温度相关的参数可以从说明书上找到。每一种蛋白质分子都有自己的等电点，酶在等电点时，其溶解度最小，易生成沉淀。这就像一个雷区，提前从说明书上获得这个信息，就可以在调节试剂pH和反应过程中避开酶的等电点，避免因为沉淀导致酶活性丧失以及影响产品品质，减少售后服务的工作量。热稳定性也是选择比较酶制剂的一个参数，酶制剂在不同温度下孵育后，残余活力越大说明酶在这个温度下越稳定，通常用半衰期来表示。半衰期越长的酶制剂，稳定性也更好，试剂的稳定性也会同样得到提升。

如果诊断试剂检测的目标物质浓度很低，那么在选择酶制剂时就需要参考Km值，这个参数代表了酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度。Km值越小，酶与底物的亲和力越大，当待检测物质浓度很低时，Km值越小的酶制剂就越有优势。

酶制剂的活力也会受到需要物质的干扰，比如Ag+、Hg2+、Fe3+等金属离子，说明书上也会列举常见的干扰物质，方便生产人员在试剂的开发和生产过程中避免这么物质的引入，降低酶活力。

温馨提示

以上这些重要的信息都可以从《酶制剂说明书》中找到，作为选择酶制剂和使用酶制剂时的参考。确认之后，就可以开始下一步的研发和生产了。