引 言

开发CO₂检测试剂盒的您，是否也曾陷入这样的困局？

试剂空白飘忽不定、加速后定标灵敏度陡降、样本测值偏差超标，熬了数周的配方说崩就崩；原料复溶后易沉淀，试剂开瓶稳定性差，试剂盒有效期直接缩水；杂酶干扰难根除，调试周期无限拉长……

作为CO₂检测的“芯片”，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（Phosphoenolpyruvate carboxylase, PEPC）的品质，直接决定CO₂试剂盒的商业化上限。瀚海新酶推出新一代CO₂检测专用PEPC，所有性能参数经过实测验证，精准破解IVD试剂盒开发三大痛点，让研发效率翻倍、产品竞争力升级！

01 核心认知：CO₂检测试剂盒的“核心引擎”——PEPC

血液CO₂浓度是诊断酸碱平衡紊乱、呼吸功能异常的关键指标，而PEPC正是CO₂检测试剂盒的“核心引擎”。本品源自重组表达的微生物源PEPC，不同于植物源PEPC，该酶无需昂贵的乙酰辅酶A、果糖-1,6-二磷酸和6-磷酸葡萄糖等激活剂，仅以Mg²⁺作为唯一辅因子，高效催化碳酸氢根与PEP（或更稳定的PEP∙3CHA）的羧化反应。与苹果酸脱氢酶（MDH）联用，通过检测NADH（或更稳定的APADH）的消耗速率，可实现CO₂浓度的快速、特异性定量检测，是单试剂检测CO₂浓度的主流方案。

表1. PEPC核心参数速览

稳定性差，效期“拉胯”：CO₂单试剂对底物（PEP和NADH）和酶（PEPC和MDH）的稳定性要求更高。市售PEPC普遍存在热稳定性不足的问题，直接导致试剂盒有效期缩短至6个月以内。

杂酶超标，精度“失准”：丙酮酸激酶（PK）和乳酸脱氢酶（LDH）等杂酶未能得到有效控制，易引发非特异性反应和底物过度消耗，导致加速后试剂空白吸光度和灵敏度大幅波动，临床样本检测偏差超出±10%，反复调试仍难达质控标准。

兼容性差，调试“耗时”：对试剂盒中EDTA、硼酸盐、表面活性剂、防腐剂等成分兼容性差，加速后酶活陡降，工程师需花费大量时间调整配方比例，研发效率大打折扣。

03 实测破局：新一代PEPC，三大核心优势直击痛点

基于CO₂试剂盒开发的实际需求，我们通过菌种筛选+生产工艺优化+试剂实测，打造出这款专属PEPC，所有核心性能均经验证，数据真实可追溯，彻底解决行业痛点。

本品在最适pH、pH稳定性、耐热性及Km值等方面优于竞品。加速稳定性与长期稳定性表现优异（见表2）：

• 加速稳定性好：37℃ 7天，干粉酶活残余≥90%；47℃保温30min，酶液活性残余≥85%，45℃以下稳定，适配极端运输与储存的情况，更稳定；

• 长期稳定好：-20℃密封保存12个月，酶活残余≥90%；

• 溶解性佳：干粉10mg/ml浓度复溶后，溶液清亮无沉淀。

▶实测价值：仅需镁离子作为辅因子，且在pH8.0左右稳定性好，是CO₂检测试剂用PEPC原料的重要筛选指标。无需额外添加复杂稳定剂，即可支撑试剂盒12个月有效期，大幅降低配方开发难度。适配单试剂检测体系的高稳定性要求。

表2.  PEPC优势性能

优势2 严格质控，从源头杜绝检测偏差

严控生产工艺，SDS-PAGE电泳纯度≥90%，杂酶含量低于竞品：

• 丙酮酸激酶（PK）：≤0.05%；

• 乳酸脱氢酶（LDH）：≤0.001%；

• NADH氧化酶（NOX）：≤0.001%。

▶ 实测价值：PK会消耗试剂中底物PEP，显著降低加速后试剂的反应度和长期稳定性。PK在菌体中有高水平内源性表达，通过纯化工艺去除杂酶，控制电泳纯度＞90%、蛋白比活≥120U/mg，批间差异小，可有效延长试剂的加速稳定性和长期稳定性。

优势3 全配方兼容，无需调整直接适配

通过序列和制剂优化，本品对各类关键化学物质兼容性广，耐受性和抗干扰能力更优秀：

• 表面活性剂：耐受 0.1% Triton X-100、 0.1% Brij 35、0.1% Tween 20和0.1% Na-cholate等；

• 金属离子及螯合剂：耐受氯化铁、氯化钴、氯化锰、硫酸锌、硫酸镍、碘乙酰胺、羟胺、EDTA、硼酸盐、氟化钠等；

• 防腐剂：耐受叠氮钠，长期放置无酶活衰减。

▶ 实测价值：现有试剂盒配方平替，无需重新研发配比，缩短研发周期。

表3：化学物质耐受性（1mg/ml，37℃ 1天）数据

04 整机实测：配套CO₂试剂盒，性能全面达标

瀚海PEPC应用于CO₂单试剂，经过严格实测验证，各项性能均表现优异，完全满足试剂盒配制及应用需求：

• 线性范围宽：0-57mM的测值与拟合值相关性好（ R＞0.990）；

• 兼顾方法学与国际进口品牌的精准度：质控在靶值范围内；批内精密度CV=1%；加速前后的测值与竞品的相关性好（ R＞0.990，见图2），且偏差小（≤10mmol/L，|B|MAX≤1，＞10mmol/L，|B%|MAX≤10%，平均偏差＜5%）；

图2. 37℃加速前后方法学比较测值相关性

• 抗干扰性强：耐受血红蛋白（≤800mg/dL）、胆红素（≤80mg/dL）、维生素C（≤60mg/dL）及乳糜（≤1000mg/dL）等血清样本中常见的干扰物，检测偏差均≤±5.0%（见表4）；

表4. CO₂单试剂抗干扰性能数据

• 加速稳定性好：37℃加速10d后，在质控打靶、灵敏度、反应度残余、酶活残余、临床样本测值方面优于竞品；

• 开瓶稳定性好：机载冷藏开瓶14d后的水空白、分析灵敏度和质控偏差符合要求；

• 批间差异小，重复性好。

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内容丨研发中心、市场部

编辑排版丨品牌

审核丨研发中心、市场部

图片丨来源于瀚海新酶、网络（侵删）