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全新升级的BST,快速、灵敏、抗逆、可冻干、温启动

来源:瀚海生物市场中心 时间:2023-05-18 作者:瀚海新酶 浏览量:1121

为什么全新升级BST?

作为分子 POCT 现场检测的主流方案之一,LAMP技术凭借反应速度快,灵敏度高,兼容显色、荧光、探针、试纸条等多种技术路线等特点被各应用领域广泛接受。

但同时,随着合作伙伴不断拓展产品应用场景到兽检、宠物检、农林传染病及转基因检测、生殖健康及呼吸道健康检测等领域,产品性能要求更便捷、更准确、更灵敏,对核心原料BST提出了更高的要求。

综合分析汇总国内外客户的需求,我们集合公司优势研发资源,从分子构建、适配体研究、应用分析测试、冻干工艺、大规模生产放大等几个维度入手,全新迭代升级了BST酶。

新版BST有哪些特性?

从用户需求出发,全新BST V2的特性具有如下几个特点,总的来说是特别抗造,以适应分子POCT的使用要求:

A 扩增速度快在应用体系中,CT值更低,更快出阳性结果;

B 样本兼容性好:兼容多种DNA 和 RNA 靶标检测,检出限低,方便客户题快速匹配引物开发;

C 抗抑制强:各项抑制成分耐受强,更适合免提取扩增体系开发,客户产品覆盖范围更广;

D 特异性高,假阳性控制好:带可逆适配体修饰,常温下酶活封闭,LAMP/RT-LAMP 60 分钟内不起峰;

E 稳定性优,且全系列可冻干:全系列热稳、冻融稳定性好,无甘油版本方便进行冻干试剂开发;

F Triton-Free 和 DTT-Free

G 大规模稳定生产,批间差稳定:用户后续产品上市放量,后顾无忧。

用户使用反馈怎么样,有数据展示吗?

此次产品升级,我们基于有成熟产品广泛使用,有多应用领域项目经验的几家大客户深入沟通,对标其现用进口原料性能及产品升级需求,汇总后有针对性的提出了全新的更高的技术要求。

经过近两年的攻坚开发,配合种子客户近半年的密集多维度评测,已在多家种子客户评测通过,在稳定使用中。经过多方面慎重评估,我们才决定在此节点对外宣传推广,以下是用户评测及对照评测的数据。

全新BST部分评测数据展示

4.1扩增速度快

4.1扩增速度快

4.1扩增速度快

A. 在三个浓度梯度下,WS Bst DNA 聚合酶 V2 均可进行全检,竞品N 公司在 0.5 cp/μL 时无检出

B. 在同浓度(1 cp/μL 和 5 cp/μL)下,WS Bst DNA 聚合酶 V2 出峰时间更快(TTR 所需时间短)

C. WS Bst DNA 聚合酶 V2 和竞品 N 公司 Bst 均能实现整体实验过程假阳性不起峰

4.2样本兼容性

DNA 体系(LAMP)

DNA 体系(LAMP)

RNA 体系(RT-LAMP)

RNA 体系(RT-LAMP)

A. Bst DNA 聚合酶 V2,内部进行测试,兼容DNA 和 RNA体系,扩增效果好。

4.3 LAMP/RT-LAMP假阳性控制

可逆适配体封闭修饰:与基于抗体的方法学类似,适配体修饰也是一种酶活封闭的方法。酶的失活是通过适配体与聚合酶在较低温度下的紧密结合,在工作温度下,适配体与酶的结合解开,启动酶活性。

LAMP RT LAMP假阳性控制

LAMP RT LAMP假阳性控制

如图举例:在使用 SARS-CoV-2 进行扩增检测时的 NTC 峰图

LAMP RT LAMP假阳性控制30°C 和65°C 下酶的活力与 Company N 对比

A. 在进行适配体修饰封闭之后,WS Bst DNA 聚合酶 V2(HMD7006与HMD7007)在 30 ℃下酶活性比 Company N更低,封闭效率更高,对控制非特异性扩增更有利。

B. 在工作温度下(65℃),活性释放彻底,与Company N 无差异。

C. 在 RT-LAMP 真实使用中,NTC 在 60 分钟内不起峰。

4.4 抗抑制能力

盐酸胍

盐酸胍

异硫氰酸胍异硫氰酸胍

氯化钾 (KCL)

氯化钾 (KCL)

A. 盐酸胍与异硫氰酸胍是常见的核酸提取残留物,Bst DNA 聚合酶V2(HMD7005)在同等浓度抑制下相对活力比竞品Bst 更优

B. 在 KCl 和NaCl 盐离子抑制下,同等情况下比竞品更优

C. 其他抑制:全血(包括单组分)、EDTA、柠檬酸钠、鼻咽拭子等抑制表现与竞品相当或者略优

D. 数据显示有更强的样本直扩适应性,方面后续 LAMP/RT-LAMP 试剂开发

4.5.可冻干酶的稳定性,100 % 无甘油

4.5.可冻干酶的稳定性,100 % 无甘油

4.5.可冻干酶的稳定性,100 % 无甘油

A. Bst DNA 聚合酶V2 及WS Bst DNA 聚合酶V2全系列产品,在 37 ℃ 下孵育 0天,3天和7天下活力保持不变

B. 为保证 LAMP/RT-LAMP 冻干试剂的开发,无甘油 Bst DNA 聚合酶V2系列(HMD7005、HMD7006、HMD7007)在反复冻融 40 次之后活力依旧保持不变。

如何选型及产品系列?

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