双链特异性 DNA 酶是一种核酸内切酶，能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键，生成带有 5′-磷酸和 3′-羟基末端的寡核苷酸。双链特异性 DNA 酶能够特异性的消化双链 DNA（double-stranded DNA, dsDNA）而不会消化单链 DNA、引物、探针和 RNA。双链特异性 DNA 酶具有热敏感性，可在 55℃条件下快速失活。双链特异性 DNA 酶主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染，与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染的方法相比，无需额外加入 EDTA 失活，可减少对 RNA 的损伤，同时节省实验时间，保证 RNA 水平定量的准确性。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
| 双链特异性DNA酶 | HSM060031 | 50rxn |
产品组分
| 组分 | 货号 | 规格 |
| 双链特异性DNA酶 (1rxn/μL) | HSM060031A | 50 μL |
| 10× dsDNase Buffer | HSM060031B | 200 μL |
活性定义
根据 Kunitz 实验方法，在 25℃、pH 5.0 的条件下，以过量的大分子 DNA 为底物，在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位（U）。
抑制与失活
抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β-巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性；
失活条件：55℃温育 5 min。
质量控制
蛋白质纯度：通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色，该酶纯度≥90%。
RNA 酶活性检测：将酶液与 RNA 底物在 37℃温育 1h，通过凝胶电泳检测没有发现 RNA 底物降解。
功能检测：该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了 RT-qPCR 扩增，发现去除率≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。
使用方法
1. 于冰上配制如下反应体系：
| 试剂 | 使用量 | |
| 双链特异性DNA酶(1rxn/μL) | 1 μL | |
| 10× dsDNase Buffer | 1 μL | |
| 模板RNA | 总RNA | 1pg~5μg/10 μL |
| mRNA | 0.1pg~500ng/10 μL | |
| 特异性RNA | 0.01ng~500ng/10 μL | |
| Nuclease-Free Water | To 10 μL | |
2. 轻轻吹打混匀反应体系后，将以上混合液在 37℃温育 2~5 min；
3. 65℃热失活 2min，迅速将获得的 RNA 置于冰上，用于后续实验。
注：长期保存请置于-80℃，避免反复冻融。
注意事项
① 若 RNA 样本下游用于 RT-PCR，且目的基因长度≥3kb，失活步骤前需添加终浓度为 10 mM 的 DTT；
② 为避免 RNA 降解，可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。
常见问题
| 问题描述 | 原因 | 解决方案 |
| RT-qPCR 实验 NTC 对照有扩增 | gDNA污染较为严重，反应时间不足 | 延长孵育时间至5min |
| RNA 模板中存在较高浓度抑制剂影响 dsDNase 酶活 | 使用75% 无水乙醇洗涤 RNA 模板，并溶解于无核酸酶水中 |
