本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶、冻干保护剂和显色染料组分。使用时只需要将 Buffer、反应酶、引物混合并加入模板即可；也可用于冻干反应体系配制，添加冻干保护剂后可以直接上冻干机冻干，使用时只需加入引物和模板即可。本产品为红黄变色反应，在扩增完成后，阳性结果为黄色，阴性结果为红色，通过肉眼观察即可对反应结果进行判读。本试剂具有较高的扩增效率和灵敏度。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| LAMP 显色法预混液（可冻干液体） | HMD5216-01 | 96 T |
| HMD5216-02 | 960 T | |
| HMD5216-03 | 9600 T |
产品组分
| 组分 | HMD5216-01 | HMD5216-02 | HMD5216-03 |
| Loop-mediated Amplification Buffer（with dye） | 0.96 mL | 4.80 mL×2 | 9.6 mL×10 |
| Enzymes Mix | 192 μL | 1.92 mL | 1.92 mL×10 |
| 冻干保护剂 | 0.96 mL×2 | 9.6 mL×2 | 9.60 mL×20 |
应用
适用于 DNA 等温扩增。
实验流程
1）将 Buffer 取出解冻，使用前充分涡旋混匀，并短暂离心收集液体至管底。
2）反应体系配制
本试剂有液体型反应体系和冻干型反应体系两种可选，请根据具体使用情况进行选择。
2.1）液体型反应体系配制
| 组分 | 体积 |
| Loop-mediated Amplification Buffer（with dye） | 10 μL |
| Enzymes Mix | 2 μL |
| 10× Primer Mixa | 5 μL |
| 模板 DNAb | x μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
2.2）冻干型反应体系配制
2.2.1）冻干体系配制
| 组分 | 体积 |
| Loop-mediated Amplification Buffer（with dye） | 10 μL |
| 冻干保护剂 | 20 μL |
| Enzymes Mix | 2 μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
2.2.2）冻干
将配制好的 Mix 按照 50 μL 体系进行冻干处理。
2.2.3）反应体系配制
| 组分 | 体积 |
| 冻干品 | 1 份 |
| 10× Primer Mixa | 5 μL |
| 模板 DNAb | x μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
备注：
a. 10× Primer Mix 浓度：16 μM FIP/BIP，2 μM F3/B3，4 μM Loop F/B；
b. 核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3）65℃恒温孵育 30-45 min，可根据颜色变化适当延长反应时间。
4）肉眼观察结果，黄色为阳性，红色为阴性。
注意事项
1）Buffer 融化后可能会有白色沉淀，在室温下充分混匀即可澄清；
2）反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃间进行优化；
3）分装后的试剂应避免长时间暴露于空气中；
4）红黄变色反应依赖反应体系的 pH 变化，请不要使用含 Tris 的核酸保存溶液，建议使用 ddH2O 保存的核酸；
5）实验应规范操作，包括反应体系的配制、冻干、样本处理及加样等过程；
6）为避免污染，建议在超净台中配制反应体系，在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
