本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含 Mg2+，dNTP 等扩增必须组分，使用时只需要将 Buffer、反应酶、荧光染料、引物混合并加入模板即可；也可用于冻干反应体系配制，添加冻干保护剂后可以直接上冻干机冻干，使用时只需加入引物和模板即可。本试剂具有较高的扩增效率和灵敏度。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| LAMP 荧光法预混液（可冻干液体） | HMD5213-01 | 96 T |
| HMD5213-02 | 960 T | |
| HMD5213-03 | 9600 T |
产品组分
| 组分 | HMD5213-01 | HMD5213-02 | HMD5213-03 |
| Loop-mediated Amplification Buffer | 1.2 mL | 4 mL×3 | 12 mL×10 |
| Enzymes Mix | 192 μL | 1.92 mL | 1.92 mL×10 |
| 冻干保护剂 | 0.96 mL | 9.6 mL | 9.6 mL×10 |
| 25× Dye | 192 μL | 0.96 mL×2 | 0.96 mL×20 |
应用
适用于 DNA 等温扩增。
实验流程
1）将 Buffer 取出解冻，使用前充分涡旋混匀，并短暂离心收集液体至管底。
2）反应体系配制
本试剂有液体型反应体系和冻干型反应体系两种可选，请根据具体使用情况进行选择。
2.1）液体型反应体系配制
| 组分 | 体积 |
| Loop-mediated Amplification Buffer | 12.5 μL |
| 25× Dye | 2 μL |
| Enzymes Mix | 2 μL |
| 10× Primer Mixa | 5 μL |
| 模板 DNAb | x μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
2.2）冻干型反应体系配制
2.2.1）冻干体系配制
| 组分 | 体积 |
| Loop-mediated Amplification Buffer | 12.5 μL |
| 冻干保护剂 | 10 μL |
| 25× Dye | 2 μL |
| Enzymes Mix | 2 μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
2.2.2）冻干
将配制好的 Mix 按照 50 μL 体系进行冻干处理。
2.2.3）反应体系配制
| 组分 | 体积 |
| 冻干品 | 1 份 |
| 10× Primer Mixa | 5 μL |
| 模板 DNAb | x μL |
| Nuclease-free Water | Up to 50 μL |
备注：
a. 10× Primer Mix 浓度：16 μM FIP/BIP，2 μM F3/B3，4 μM Loop F/B；
b. 核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3）扩增反应
在荧光 PCR 仪（如 ABI7500 等）上设置如下程序。
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 65℃ | 60 s *收集 FAM 荧光 | 30 |
注意事项
1）Buffer 融化后可能会有白色沉淀，在室温下充分混匀即可澄清；
2）反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃间进行优化；
3）实验应规范操作，包括反应体系的配制、冻干、样本处理及加样等过程；
4）为避免污染，建议在超净台中配制反应体系，在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
