2x qPCR SYBR Master Mix 是使用 SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行实时定量 PCR 反应的专用预混液。Mix 中含有升级改造的新一代热启动聚合酶，具有更强的特异性，更高的灵敏度和更好的扩增性能。配方中还添加有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和特异性促进因子，非常适配于对特异性，灵敏度高要求的 qPCR 扩增。
本产品适用于所有 qPCR 仪器，无需调整 ROX 浓度，使用时仅需要在扩增体系中加入模板和引物即可进行实时荧光定量 PCR，操作简单， 能大大提高实验效率，降低实验污染。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 2x qPCR SYBR Master Mix | HMD3810-01 | 100 rxn |
| HMD3810-02 | 500 rxn |
产品组分
| 组分 | 货号 | 规格 |
| 2x qPCR SYBR Master Mix | HMD3810-01 | 1×1 mL |
| HMD3810-02 | 5×1 mL |
注意事项
•操作过程中请使用RNase free耗材和专用的移液枪和带滤芯的枪头，以免造成不必要的污染
•吸取反应液时应尽量避免气泡，如果操作不慎引起气泡，需再次离心方可使用，进行上机时请检查 PCR 管管盖是否盖紧以避免液体蒸发导致的结果不准确及扩增产物污染
•本产品尽量避免反复冻融，以免造成酶活性下降，如每次使用量较少，推荐分装使用
•试剂使用前请务必充分融化混匀，不同批号试剂不宜混合使用
•由于本产品检测灵敏度极高，易被气溶胶污染，推荐在超净台内进行反应体系的配置
反应体系
| 组分 | 体积 |
| 2x qPCR SYBR Master Mix | 10 μL |
| Primer1（10μM）a | 0.4μL |
| Primer2（10μM） | 0.4μL |
| 模板 DNAb | X μL |
| 无核酸酶水 | Up to 20 μL |
a:引物浓度通常为 0.2μM，当扩增性能较差时可根据实际情况自行优化。
b: 推荐将模板稀释后加入反应体系中，这样可以有效提高实验的重复性，若模板类型为未稀释的 cDNA 原液，使用体积不宜超过 qPCR 反应总体积的 1/10。
反应程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 30s | 1Cycle |
| 变性 | 95℃ | 10s | 45Cycles |
| 退火c | 60℃ | 30s | |
| 熔解曲线 | 使用仪器默认熔解曲线采集程序 |
c: 建议的退火温度为 60℃，可根据设计引物实际 Tm 值进行调整，一般设置成低于引物 Tm 值 3-5℃即可。
