产品描述
本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶、 冻干保护剂和显色染料组分。其中反应缓冲液 中含 Mg2+,dNTP 等扩增必须组分。产品为 冻干球剂型,使用时只需要加入引物和模板即 可。本产品为红黄变色反应 ,在扩增完成后, 阳性结果为黄色,阴性结果为红色,通过肉眼 观察即可对反应结果进行判读。本试剂具有较 高的扩增效率和灵敏度。
产品组分
组分 |
HMD5214-01 |
HMD5214-02 |
HMD5214-03 |
LAMP 显色法 预混液(冻干球) |
8 T/条*12 条 |
8 T/条*120 条 |
8 T/条*1200 条 |
应用
适用于 DNA 等温扩增。
运输与保存方法
2~8℃运输 ,2~8℃保存。产品有效期12 个 月 。
实验流程
1)根据测试数取出相应个数的冻干球。
2)反应体系配制
组分 |
用量 |
LAMP 显色法预混液(冻干球) |
1 份(2 颗) |
10×Primer Mixa |
5 μL |
模板 DNA |
补足至 50 μL |
总量 |
50 μL |
备注:
a. 10×Primer Mix 浓度:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B ;
b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3)65°C 恒温孵育 30-45min ,可根据颜色变 化适当延长反应时间。
4)肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。
注意事项
1)反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃间 进行优化;
2)分装后的试剂应避免长时间暴露于空气中;
3)红黄变色反应依赖反应体系的 pH 变化 , 请不要使用含 Tris 的核酸保存溶液 ,建议使用 ddH2O 保存的核酸;
4)实验应规范操作 ,包括反应体系的配制、 冻干、样本处理及加样等过程;
5)为避免污染 ,建议在超净台中配制反应体 系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生 假阳性干