产品描述
本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶、 冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液 中含 Mg2+,dNTP 等扩增必须组分。产品为冻 干剂型 ,使用时只需要加入引物和模板即可。
产品组分
组分 |
HMD5212-01 |
HMD5212-02 |
HMD5212-03 |
LAMP荧光法预混液(管底冻干) |
8T/条*12 条 |
8T/条*120 条 |
8T/条*1200 条 |
应用
适用于 DNA 等温扩增。
运输与保存方法
2~8℃运输 ,2~8℃保存。产品有效期12个月 。
实验流程
1)根据测试数取出相应个数的冻干试剂。
2)反应体系配制
组分 |
用量 |
LAMP 荧光法预混液(管底冻干) |
1 份 |
10×Primer Mixa |
5 μL |
模板 DNA |
补足至 50 μL |
总量 |
50 μL |
备注:
a. 10×Primer Mix 浓度:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B ;
b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3)扩增反应
在荧光 PCR 仪(如 ABI7500 等)上设置如 下程序。
温度 |
时间 |
循环数 |
65℃ |
60s *收集 FAM 荧光 |
30 |
注意事项
1)反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃间 进行优化;
2)实验应规范操作 ,包括反应体系的配制、 样本处理及加样等过程;
3)为避免污染 ,建议在超净台中配制反应体 系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生 假阳性干扰。