产品概述
Multiplex qPCR Probe Mix U+ (Fast) 是以 DNA 为模板的一种探针法多重荧光定量 PCR 试剂。 本产品可用于快速扩增，可以在短时间内完成多重扩增。同时本产品含有 UDG/dUTP 防污染系统， 可在室温下消除扩增产物的污染。
产品组成
| 组分 | 100 rxns | 1,000 rxns | 10,000 rxns |
| 4× qPCR buffer U+ | 1.25 mL | 12.5 mL | 125 mL |
| 50× Enzyme mix U+ | 100 μL | 1 mL | 10 mL |
运输与保存方法
≤0℃运输；-25~-15℃保存。
注意事项
4× qPCR buffer U+在使用前请充分混匀，解冻后如有沉淀待试剂恢复至室温后混匀溶解即可正常使用。
试剂准备
| 组分 | 体系 |
| 4× qPCR buffer U+ | 12.5 μL |
| 50× Enzyme mix U+ | 1 μL |
| Primer Forward | 0.1~1.0 μM |
| Primer Reverse | 0.1~1.0 μM |
| TagMan Probe | 0.05~0.25 μM |
| DNA 模板 | X μL |
| dd H2O | Add to 50 μL |
注：引物探针浓度可根据实验进行调整。
标准扩增程序
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间（min:sec） |
| UDG 水解 | 1 | 37℃ | 02:00 |
| 预变性 | 1 | 95℃ | 01:00 |
| 扩增a | 45 | 95℃ | 00:10 |
| 60℃ | 00:30 |
快速扩增程序
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间（min:sec） |
| UDG 水解 | 1 | 37℃ | 02:00 |
| 预变性 | 1 | 95℃ | 00:30 |
| 扩增a | 42 | 95℃ | 00:05 |
| 60℃ | 00:10 |
a. 最适退火/延伸温度根据引物的 Tm 值调试，荧光采集时间需要根据使用的 Real Time PCR 仪器的最短数据采集时间调整。
