视黄酸诱导基因-I(RIG-I)是一种胞质病原体识别受体,可启动针对许多RNA病毒的免疫反应。RIG-I属于RNA解旋酶的DExD/H家族,与所有解旋酶一样,RIG-I具有ATP酶活性,与dsRNA 结合后,其ATPase酶活被激发,将ATP水解为ADP+Pi。本试剂盒通过检测RIG-I和样本反应过程中产生的ADP量来测定样本中dsRNA的含量。测定在多孔板中进行,可在低至5μL的反应体积内检测。 检测分三步进行:首先,将RIG-I酶、ATP与样本混合孵育启动反应。在反应后,加入等体积的试剂1耗尽剩余的ATP。最后,加入试剂2,将ADP转化为ATP,并利用萤光素酶/萤光素反应测量新生成的 ATP。产生的发光信号用酶标仪测量。根据标准曲线,可计算样本中dsRNA含量。
产品性质
本试剂盒通过检测RIG-I 与样本反应产生的 ADP 量来定量测定样本中dsRNA 的含量。
试剂盒组成
类别 | 组分名称 | 96T | 384T |
RIG-I ATP 酶反应 | RIG-I 酶(1μM) | 100μL | 400μL |
RIG-I反应缓冲液(10×) | 0.25mL | 1mL | |
1MDTT | 20μL | 50μL | |
10mM ATP | 25μL | 100μL | |
dsRNA 标准品(无修饰,25ng/μL) | 40μL | 150μL | |
dsRNA标准品(N1-Me-pUTP修饰,25ng/μL) | 40μL | 150μL | |
ADP 检测 | 试剂1-缓冲液 | 0.5mL | 2mL |
试剂1-酶(5×) | 0.125m | 0.5mL | |
试剂1-0.5MMnCl2 | 25μL | 100μL | |
试剂2 | 1.25mL | 5mL | |
检测板 | 384孔板 | 1 | 1 |
说明书 | 1 | 1 |