产品描述
本产品中包含反应缓冲液、 Bst DNA 聚合酶 和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻 干保护剂组分。其中反应缓冲液中含 Mg2+ ， dNTP 等扩增必须组分。产品为管底冻干剂 型 ，使用时只需要加入引物探针和模板即可。
产品组分
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组分 |
HMD5221-01 |
HMD5221-02 |
HMD5221-03 |
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RT-LAMP 探针 法预混液 （管底冻干） |
8 T/条*12 条 |
8 T/条*120 条 |
8 T/条*1200 条 |
为避免污染 ，建议在超净台中配制反应体系 ，在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
运输与保存方法
2～8℃运输 ，2～8℃保存。产品有效期12个月 。
实验流程
1) 根据测试数取出相应个数的管底冻干粉。
2) 反应体系配制
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组分 |
用量 |
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RT-LAMP 探针法预混液 （管底冻干） |
1 份 |
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10×Primer probe Mixa |
5 μL |
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模板 RNAb |
45 μL |
备注：
a. 10×Primer probe Mix 浓度： 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B , 4μM Probe;
b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3) 扩增反应
在荧光 PCR 仪（如 ABI7500 等）上设置如 下程序。
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温度 |
时间 |
循环数 |
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65℃ |
60s *收集 FAM 荧光 |
30 |
注意事项
1) 反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃ 间进行优化；
2) 实验应规范操作，包括反应体系的配制、 样本处理及加样等过程；
3) 为避免污染 ，建议在超净台中配制反应体系 ，在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
