产品描述
本产品中包含反应缓冲液、 Bst DNA 聚合酶 和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻干 保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含 Mg2+ ，dNTP 等扩增必须组分。产品为冻干 球剂型 ，使用时只需要加入引物和模板即可。
产品组分
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组分 |
HMD5209-01 |
HMD5209-02 |
HMD5209-03 |
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RT-LAMP荧光法预混液（冻干球） |
8 T/条×12 条 |
8 T/条×120 条 |
8 T/条×1200 条 |
应用
适用于 DNA、RNA 等温扩增。
运输与保存方法
2～8℃运输 ，2～8℃保存。产品有效期12个月 。
实验流程
1）根据测试数取出相应个数的冻干球。
2）反应体系配制
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组分 |
用量 |
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RT-LAMP荧光法预混液（冻干球） |
1份（2颗） |
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10×Primer Mixa |
5μL |
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模板DNA/ RNAb |
45μL |
备注：
a. 10×Primer Mix 浓度：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B ;
b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3）扩增反应
在荧光 PCR 仪（如 ABI7500 等）上设置如 下程序。
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温度 |
时间 |
循环数 |
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65℃ |
60s *收集 FAM 荧光 |
30 |
注意事项
1）反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃间 进行优化；
2）实验应规范操作 ，包括反应体系的配制、 样本处理及加样等过程；
3）为避免污染 ，建议在超净台中配制反应体 系，在其他房间的通风橱中加入模板以免产生 假阳性干扰。
