产品概述
Taq 酶双封闭抗体 V2 是我公司开发的一款针对 Taq 酶的 5’→3’ 聚合酶活性与 5’→3’ 外切酶活性 进行双位点封闭的产品。 Taq 酶双封闭抗体 V2 在 PCR 体系升温过程中可有效防止 Taq 活性的泄露, 抑制 5’→3’ 聚合酶的活性,从而抑制低温条件下由引物非特异性扩增; 抑制 5’→3’ 核酸外切酶活性,从而防止 qPCR 反应体系中的探针或引物被切割, 影响试剂性能。
本产品可快速激活,只需在 95℃加热 30s, 即可完全释放 Taq 酶活性。 使用本产品封闭 Taq DNA 聚合酶,能够显著提高扩增特异性, 以及低模板检出率。 使用本品无需对抗体进行特殊的失活处理,可兼容现有的 PCR 反应条件。
运输与保存方法
≤0℃运输;-25~-15℃保存。
保质期
有效期 2 年。
质量控制
• 纯度:(SDS-page)≥95%。
• 核酸内切酶残留: 2 μg 本品和 1 μg λ DNA,37℃孵育 16 小时, DNA 的电泳谱带不发生变化。
• 核酸外切酶残留: 2 μg 本品与 1 μg λ-Hind III digest DNA, 37℃孵育 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化。
• Nickase 残留: 2 μg 本品和 1 μg pBR322, 37℃孵育 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化。
• RNase 残留: 2 μg 本品和 1.6 μg MS2 RNA, 37℃孵育 4 小时,RNA 的电泳谱带不发生变化。
• 宿主核酸残留: 35 Cycles PCR 鉴定无残源基因组 DNA 的污染。
使用方法
本产品浓度为 3 mg/mL,按照酶活封闭, 建议 1 μL 抗体封闭 15-75 U Taq DNA 聚合酶活性。 Taq 酶与抗体按照体积比 1:1 进行混合, 室温混匀孵育 30 min,-20℃保存过夜后使用。
按照蛋白量封闭,建议 1 μL 抗体封闭 0.3~1.5 μg Taq DNA 聚合酶活性, Taq 酶与抗体按照体积比 1:1 进行混合, 室温混匀孵育 30 min, -20℃保存过夜后使用。
(体积大于 200mL 混匀 2 小时,更大体积客户自行进行工艺调整。)
注意:封闭比例可根据需求客户适当调整。
注意事项
• 尽量避免反复冻融,操作时请佩戴手套。
• 由于不同 Taq 酶的比活有差异,封闭比例可以适当调整, 封闭效率高于 95% 为宜。
