BspQ I 限制性内切酶是由大肠杆菌重组表达的球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus）BspQ I 基因编码的重组蛋白，是一种 IIS 类限制性内切酶，可识别特异性位点，其识别序列和切割位点如下：
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| BspQ I 限制性内切酶 | HBP001406-1 | 0.5 KU |
| HBP001406-2 | 2.5 KU | |
| HBP001406-3 | 10 KU | |
| HBP001406-4 | 100 KU | |
| HBP001406-5 | 1000 KU |
产品组分
| 组分 | HBP001406-1 | HBP001406-2 |
|---|---|---|
| BspQ I（10 U/μL） | 50 μL | 250 μL |
| 10× BspQ I Buffer | 1.25 mL | 1.25 mL |
| 组分 | HBP001406-3 | HBP001406-4 |
|---|---|---|
| BspQ I（10 U/μL） | 1 mL | 10 mL |
| 10× BspQ I Buffer | 4×1.25 mL | 12.5 mL |
| 组分 | HBP001406-5 |
|---|---|
| BspQ I（10 U/μL） | 100 mL |
| 10× BspQ I Buffer | 125 mL |
随货附赠 10× BspQ I Buffer 货号如下：
| 货号 | 规格 |
|---|---|
| HBP200034-1 | 1.25 mL |
| HBP200034-2 | 12.5 mL |
| HBP200034-3 | 125 mL |
运输与保存方法
≤0℃运输；-25~-15℃保存。
储存缓冲液
20 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg/ml Recombinant Albumin, 0.1% Trition X-100 and 50% glycerol (pH 7.0 @ 25℃).
活性定义
在 50℃条件下，50 μL 反应体系中，1 小时内完全切割 1 μg 内部对照品 DNA 所需要的酶量定义为 1 个活性单位。
质量控制
蛋白纯度（SDS-PAGE）：通过 SDS-PAGE 分析，BspQ I 纯度≥95%；
RNase 活性：10 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 50℃下反应 4 小时，RNA 的电泳谱带不发生变化；
非特异性 DNase 活性：10 U 的本品和 1 μg λDNA 在 50℃下反应 16 小时，相对于 50℃反应 1 小时，无多余的 DNA 电泳谱带产生；
酶切-连接-再酶切检测：使用 10 U 本品消化 1 μg λDNA，在 16℃下使用适量 T4 DNA 连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物；
大肠杆菌 DNA 残留检测：经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测，E.coli 基因组残留≤0.1 pg/μL；
宿主蛋白残留：≤50 ppm；
细菌内毒素（Endotoxin）：LAL-Test，中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法通则（1143），细菌内毒素含量≤10 EU/mg；
反应体系和条件
| Component | Volume |
|---|---|
| BspQ I（10 U/μL） | 1 μL |
| DNA | 1 μg |
| 10× BspQ I Buffer | 5 μL |
| ddH2O | Up to 50 μL |
反应条件：50℃孵育 1~16 h。
热失活：80℃，20 min。
本说明书推荐体系可以提供较好的酶切效果，仅供参考，具体请以实验结果为准。
产品应用
限制性内切酶消化、快速克隆。
产品特点
1. 限制性内切酶的酶活力高，迅速完成酶切反应；
2. 低非特异性内切酶活性，保证“手术刀”般的精准切割；
3. 体系中无动物源物料 BSA。
甲基化修饰影响
dam 甲基化：不敏感；
dcm 甲基化：不敏感；
CpG 甲基化：不敏感；
注意事项
1. 限制性内切酶添加体积不超过反应体积的 1/10；
2. 甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性；
3. 酶量：DNA 低于推荐比例可能出现切刻活性。
