产品概述
本试剂盒采用一步酶联免疫 ELISA 法，用于检测样本中 CHO 宿主蛋白残留量。含有 CHO HCP 的样品可以与 HRP 标记的山羊抗 CHO 抗体以及包被在酶标板上的抗 CHO 抗体同时反应，最终形成一种夹心复合物的固相抗体-HCP-标记抗体。通过清洗酶标板可以去除未结合的抗原抗体。向孔中加入 TMB 底物充分反应后，加入终止液后停止显色，用酶标仪读取反应溶液在 450/650nm 处的 OD 或吸光值。OD 值或吸光值与溶液中的 HCP 含量成正比。据此可以根据标准曲线计算出溶液中的 HCP 浓度。
产品性质
本试剂盒用于定量检测样本中 CHO HCP 的含量。
试剂盒组成
| 序号 | 组分名称 | 48T | 96T |
| 1 | CHO HCP 标准品（100~0ng/mL） | 0.5mL*8 | 1mL*8 |
| 2 | CHO HCP 标准品（1000ng/mL） | 0.5mL | 1mL |
| 3 | Anti-CHO-HCP-HRP（100×） | 60μL | 120μL |
| 4 | TMB | 6mL | 12mL |
| 5 | 20× PBST 0.05% | 7.5mL | 15mL |
| 6 | 稀释液 | 25mL | 50mL |
| 7 | 反应板 | 8×6 孔 | 8×12 孔 |
| 8 | 终止液 | 3mL | 6mL |
| 9 | 封板膜 | 2 张 | 4 张 |
| 10 | 说明书 | 1 份 | 1 份 |
表一：试剂盒组成
所需仪器
1、酶标仪（含 450nm 波长，建议含有双波长检测模式，主副波长分别为 450nm 和 650nm）。
2、微孔板摇床。
运输及保存方法
1、试剂盒于 2~8℃ 储存，避免强光直射，有效期 12 个月。
2、包被条拆封使用后，应将剩余包被条密封，在 2~8℃ 储存，在有效期内使用。
检测流程图
产品参数
1、灵敏度：1 ng/mL
2、检测范围：3-100ng/mL
3、精密度：批内变异系数≤10%，批间变异系数≤15%
4、HCP 覆盖率：80%以上
5、特异性：本试剂盒是通用的，因为它可以同 CHO HCP 发生特异反应，而不依赖于纯化过程
试剂准备
1、PBST 0.05%
20×PBST 0.05%用纯化水按 1：19 体积比稀释成洗涤工作液。
2、1×检测液
将 100× Anti-CHO-HCP-HRP 在使用前用稀释液作 100 倍稀释后使用。
实验流程
1、按上述“试剂准备”配制好试剂。
2、取 50μL 标准品（标准曲线：100、75、40、12、6、3、1、0ng/mL）、样品于孔板，然后加入 100μL 工作浓度的检测液，用封口膜封住酶标板，将酶标板放置在混匀仪上，500rpm、25±3℃孵育 2 小时。
3、弃去液体，将板子倒扣在干净的纸巾上并拍干。取 300μL 的 PBST 0.05%于微孔中清洗酶标板并弃去溶液，重复清洗 3 次，吸水纸上拍干。
4、每孔加入 100μL TMB 底物，密封酶标板，25±3℃避光孵育 15min。
5、每孔加入 50μL 终止液。
6、酶标仪 450/650nm 波长处读取吸光度。
7、通过 SoftMax 或类似软件分析数据，用四参数拟合回归模型绘制标准曲线。
标准曲线示例
注：如果样品中 HCP 的浓度超过标准曲线的上限，则需要在测试前用稀释液适当稀释。
注意事项
1. 显色温度和时间对实验结果至关重要，应准确把握。若出现按常规操作流程，测值超出仪器可检测范围现象，可适当减少显色时间。
2. 洗涤过程中应使洗涤液浸泡反应板 30s 后再甩干，以充分洗涤非特异性吸附的成分。
3. 所有试剂使用前应充分摇匀，加样时应将所加样物加入酶标板孔中底部，避免加在孔壁上部，加样时注意不可溅出，不可产生气泡。
4. 若发现浓缩洗涤液中有结晶，可在 37℃水浴锅中孵育，待结晶完全溶解后再混匀稀释至工作浓度。
5. 样本中应避免引入叠氮化钠（NaN3），叠氮化钠会破坏辣根过氧化酶活性，使检测值偏低。
6. 不同批次组分的试剂不可以混用，移液器枪头不可混用，避免交叉污染。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴好手套进行实验操作。
8. 本产品仅供科学研究使用，不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。
