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WS Bst DNA 聚合酶V2(无甘油)
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WS Bst DNA 聚合酶V2(无甘油)

英文名称:WS Bst DNA Polymerase V2 (Glycerol-free)

  • 3530
1600 U
HMD7006-01
8000 U
HMD7006-02
80000 U
HMD7006-03

货号:HMD7006-01、HMD7006-02、HMD7006-03

运输与保存方法:≤0℃运输;-25~-15℃保存。

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Bst DNA 聚合酶 V2 来源于 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I,含有 5´→3´DNA 聚合酶活性和强链置换活性, 但缺乏 5´→3´核酸外切酶活性,可用于 DNA 链置换反应 、 等温扩增 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification) 和快速测序等。WS Bst DNA 聚合酶 V2 是在 Bst DNA 聚合酶 V2 的基础上,采用可逆性修饰技术获得的热启动版本,能够在室温条件下抑制 DNA 聚合酶活性,因此可在室温操作并配制反应体系,防止非特异性扩增,提高反应效率,且该版本可冻干。另外,在高温下能够释放其活性,因此无需单独激活步骤。


产品信息

产品名称货号规格
WS Bst DNA 聚合酶 V2(无甘油)HMD7006-011600 U
HMD7006-028000 U
HMD7006-0380000 U


产品组分

组分HMD7006-01HMD7006-02HMD7006-03
WS Bst DNA 聚合酶 V2(无甘油)(8 U/μL)0.2 mL1 mL10 mL
10× HH Bst V2 Buffer1.5 mL2×1.5 mL3×10 mL
MgSO4(100 mM)1.5 mL2×1.5 mL2×10 mL


单位定义

65℃条件下,在 30 min 内将 25 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性物质所需要的酶量定义为 1 个活性单位。


质量控制

• 蛋白纯度(SDS-PAGE):通过 SDS-PAGE 分析,纯度 ≥ 99%;

• 核酸内切酶残留检测:50 μL 反应体系中加入 8 U 本酶和 1 μg λDNA 在 37℃下反应 16 小时,琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化。

• 核酸外切酶残留检测:50 μL 反应体系中加入 8 U 本酶和 1 μg λ-Hind Ⅲ digest DNA 在 37℃下孵育 16 小时,琼脂糖凝胶 DNA 谱带不发生变化。

• 切口酶残留检测:50 μL 反应体系中加入 8 U 本酶和 1 μg pBR322 DNA 在 37℃下孵育 16 小时,琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化。

• RNase 残留检测:50 μL 反应体系中加入 8 U 本酶和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下孵育 16 小时,琼脂糖凝胶电泳 RNA 谱带不发生变化。

• 大肠杆菌 DNA 残留检测:120 U 本品中残留的核酸经E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝;


LAMP 反应体系配制

组分25 μL 体系
10× HH Bst V2 Buffer2.5 μL
MgSO4(100 mM)1.5 μL
dNTPs(10 mM each)3.5 μL
SYTO 16 Green(25×)*1.0 μL
Primer mix**6 μL
WS Bst DNA 聚合酶 V2(无甘油)(8 U/μL)1 μL
TemplateX μL
ddH2OUp to 25 μL

*SYTO 16 Green(25×):依据实验需要,可用其他染料替代;

**Primer mix:通过将 20 μM FIP、20 μM BIP、2.5 μM F3、2.5 μM B3、5 μM LF、5 μM LB 等体积混合配制得到。


反应条件

1× HH Bst V2 Buffer 体系里,孵育温度 60℃-65℃。


热失活

80℃,20 min。


应用

1. LAMP 等温扩增;

2. DNA 链置换反应;

3. 高 GC 基因测序;

4. 纳克量级别模板的 DNA 测序。

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