极限耐热单链 DNA 结合蛋白 (Extreme Thermostable single-strand DNA Binding Protein)是一种从耐热微生物中分离出来的单链 DNA 结合蛋白,分子量为 16 kDa。在 95℃孵育 60 min 后仍保持充分的活性。由于极限耐热单链 DNA 结合蛋白具有极高的热稳定性,因此可以用于要求极高温度条件的应用, 如核酸扩增和测序。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 极限耐热单链 DNA 结合蛋白 | HSM090051 | 100 μg |
产品组分
| 组分名称 | 规格 |
| 极限耐热单链 DNA 结合蛋白(500μg/mL) | 200 μL |
缓冲液
20 mM Tris-HCl(pH 7.5),200 mM NaCl,0.5 mM DTT,1 mM EDTA 和 50%甘油。
质量控制
蛋白纯度:使用 SDS-PAGE 凝胶电泳检测, 蛋白纯度不低于 95%。
核酸内切酶活性:将 0.5 μg 极限耐热单链 DNA 结合蛋白与 200 ng 超螺旋质粒 DNA 在 37℃下,共同孵育 4 h 后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于 10%的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。
非特异性核酸内切酶活性:将 0.5 μg 极限耐热单链 DNA 结合蛋白与15 ng双链DNA片段在 37℃温育 16 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测双链 DNA 底物无变化。
宿主 DNA 残留:使用大肠杆菌 16S rDNA 特异性引物探针组,采用荧光定量 PCR 法检测 0.5 μg 极限耐热单链 DNA 结合蛋白,大肠杆菌宿主基因组 DNA 残留低于 10 copies。
使用方法
1. 极限耐热单链 DNA 结合蛋白在任何聚合酶缓冲液中均有活性;
2. 每 50 μL 反应体系加入 50~200 ng 的极限耐热单链 DNA 结合蛋白。
应用方向
1. 提高 DNA 聚合酶的持续合成能力;
2. 稳定和标记 ssDNA 结构;
3. 提高PCR和等温扩增反应的产量和特异性;
4. 在RT-PCR过程中提高RT的产量和转化率;
5. 在具有强二级结构的区域改进 DNA 测序;
6. 增强RecA对ssDNA 结合和链转移的活性。
注意事项
本产品仅供科学研究使用,不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。
