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Taq DNA聚合酶单抗(B8)
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Taq DNA聚合酶单抗(B8)

  • 4339
100 μL
HSM020101

货号:HSM020101

运输及保存方法:在0℃以下进行运输;于-25~-15℃保存。注:避免反复冻融。

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Taq DNA 聚合酶单抗(B8)是 Taq DNA polymerase 的鼠源单克隆抗体,与 Taq DNA polymerase 结合后能够有效封闭 DNA 外切酶活性。本品与 Taq DNA polymerase 的亲和力非常高,在 55℃下仍然可以封闭 95% 以上 Taq DNA polymerase 的外切酶活性,因此可以非常有效地抑制低温时错配探针或其它物料的降解,减少非特异性信号。本品只需要在 95℃ 加热 30 s 即可与 Taq DNA polymerase 不可逆解离,释放外切酶活性。 本品尤其适用于基于探针法的荧光定量 PCR 反应等。

外切活性封闭抗体和聚合活性封闭抗体可混合使用,获得双封闭抗体,与 Taq DNA polymerase结合后可同时封闭聚合酶与外切酶活性,进一步提高反应特异性。


产品信息

产品名称 货号 规格
Taq DNA聚合酶单抗(B8) HSM020101 100 μL


质量控制

蛋白纯度:使用 SDS-PAGE 凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于 90%。

功能检测:①活性封闭检测:将经 Taq DNA 聚合酶单抗(B8)封闭的 Taq DNA Polymerase 在 50℃孵育 4h 后,其活性释放率低于 5%。

②热启动检测:将经 Taq DNA 聚合酶单抗(B8) 封闭的Taq DNA Polymerase 在95℃孵育30 s 后检测外切酶活性,活性释放≥95%。

核酸内切酶活性检测:将1 μg Taq DNA聚合酶单抗(B8)与 200ng 超螺旋质粒 DNA 在 37℃ 下,共同温育 4h 后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于 10%的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。

非特异性内切酶活性检测:将1 μgTaq DNA聚合酶单抗(B8) 与 15ng 双链 DNA 片段在 37℃孵育 16 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测检测双链 DNA 底物无变化。

宿主 DNA 残留检测:使用 CHO 细胞特异性引物探针组,采用荧光定量 PCR 法检测 1 μg Taq DNA 聚合酶单抗(B8),宿主基因组 DNA 残留低于 1copy。


使用方法


反应体系

抗体与 Taq 酶的摩尔比在 3:1 时即可完全封闭,首次使用推荐进行不同摩尔比的测试以达到使用效果,具体过程可参考以下步骤:

1.依据下表配制 Taq DNA 聚合酶单抗(B8) 与 Taq DNA 聚合酶孵育体系(可依据需求进行调整): 

摩尔比 1:1 2:1 3:1 5:1
Taq DNA聚合酶单抗(B8)(1.5 mg/mL) 16μg 32μg 48μg 80μg
Taq DNA 聚合酶a 10μg 10μg 10μg 10μg
Taq 储存液b To 100μL

a. 不同公司的 Taq 酶分子量可能存在差异, 此表格推荐的用量为按照 Taq 分子量 94 kDa, 抗体分子量 150 kDa 进行计算,实际使用中可按照所用 Taq 的分子量自行调整。 

b.Taq 储存液配方:50 mM Tris-HCI, 50mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH8.0±0.05@25℃ 。


2.上述体系轻柔混合均匀后置于 37℃水浴中孵育 3h,即可得到终浓度为 0.1 mg/mL 的热启动 Taq 酶。


注意事项

1.本产品仅供科学研究使用,不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。

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