Hi Trans 通用型转染试剂是一种离子聚合物类转染试剂，能高效转染 DNA 和 siRNA 进入真核细胞。对一些原代和难转染的细胞也能取得较高的转染效率。并且该转染试剂毒性极低，对抗生素和血清都有很好的耐受性，对贴壁细胞和悬浮细胞均可有效转染。可适用于质粒 DNA 和 siRNA 的单独转染和共转染。
产品信息
| 产品 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| Hi Trans 通用型转染试剂 | HSC020161 | 0.75 mL |
自备产品
稀释液：减血清 MEM 培养基。
输与保存方法
运输方式：冰袋运输，不可冷冻。
保存方式：2-8ºC保存，有效期 1 年。
使用说明
贴壁细胞质粒 DNA 转染（以 24 孔板为例）
1. 接种细胞
将贴壁细胞培养在细胞培养板、方瓶、细胞工厂或生物反应器中，并使用合适的培养基进行培养。将细胞调整到较好的生长状态，建议细胞铺板密度 0.5-1.5×105个细胞/孔，保持细胞的混合度为 50-80%，使第二天转染时细胞密度为 70-90%。
2．转染复合物配置
质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）的比例为 1:1~1:3，首次试用，建议采用 1:2 进行预实验。
1）质粒稀释液准备：将 0.8 μg 质粒加入减血清 MEM 中，使得总体积为 48.4 μL，并轻缓吹打混匀。
2）配置复合物：将 1.6 μL Hi Trans 转染试剂加入到 48.4 μL 质粒稀释液中，轻缓吹打混匀后，室温静置 15-20 min，形成质粒-Trans 复合物，备用。
3．转染细胞
1）直接将 50 μL 的质粒-Trans 复合物加入 24 孔板培养的贴壁细胞中，轻摇混匀。
2）在合适温度与 CO2等条件下(如 37°C, 5% CO2)进行细胞转染，4-6 h 后更换为新鲜完全培养基（可选），轻缓摇匀。
3）在合适温度与 CO2等条件下(如 37°C, 5% CO2)继续培养细胞 24 h-48 h。
贴壁细胞质粒 siRNA 转染（以 24 孔板为例）
所需 siRNA 和 Hi Trans 的量分别为 50 pmol 和 2 μL，操作步骤同质粒 DNA 转染。
备注：不同培养体积细胞转染用量见附表 1。
注意事项
• 为提高转染效率，建议取对数生长期细胞，且活率>95%再进行转染操作；
• 转染过程中推荐使用高质量的质粒，转染的 DNA，A260/A280 在 1.8-2.0 之间，内毒素小于 1 EU/μg。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及生物安全柜操作。
• 本产品仅用于科研用途。
附表1 不同细胞培养板转染贴壁细胞时培养基、核酸和试剂用量
| 培养容器 | 表面积（cm2） | 培养基总体积 | DNA | siRNA | 稀释液体积（μL） | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| DNA（μg） | 转染试剂用量（μL） | siRNA（pmol） | 转染试剂用量（μL） | ||||
| 96孔板 | 0.3 | 100 μL | 0.2 | 0.2-0.6 | 10 | 0.25-0.65 | 10 |
| 48孔板 | 0.7 | 200 μL | 0.4 | 0.4-1.2 | 20 | 0.5-1.25 | 20 |
| 24孔板 | 1.9 | 500 μL | 0.8 | 0.8-2.4 | 50 | 1-2.5 | 50 |
| 12孔板 | 3.8 | 1 mL | 1.6 | 1.6-4.8 | 100 | 2-5 | 100 |
| 6孔板 | 10 | 2 mL | 4 | 4-12 | 250 | 5-12.5 | 200 |
| 10 cm培养皿 | 60 | 10 mL | 24 | 24-72 | 1500 | 30-75 | 1000 |
| 25 cm²培养瓶 | 25 | 6 mL | 10 | 10-30 | 625 | 12.5-31.5 | 600 |
| 75 cm²培养瓶 | 75 | 20 mL | 30 | 30-90 | 2000 | 40-100 | 2000 |
