Hi Trans DNA 转染试剂是一种脂质体类转染试剂，能高效转染 DNA。特别是针对一些难转染的细胞，如肿瘤细胞，神经细胞等，可以取得较高的转染效率。并且该转染试剂毒性极低，对抗生素有很好的耐受性，可适用于质粒 DNA 的单独转染和共转染。
产品信息
| 产品 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| Hi Trans DNA 转染试剂 | HSC020151 | 0.75 mL |
自备产品
稀释液：减血清 MEM 培养基。
运输与保存方法
运输方式：冰袋运输，不可冷冻。
保存方式：2-8ºC保存，有效期 1 年。
使用说明
贴壁细胞转染（以 24 孔板为例）
1. 接种细胞
将贴壁细胞培养在细胞培养板、方瓶、细胞工厂或生物反应器中，并使用合适的培养基进行培养。将细胞调整到较好的生长状态，建议细胞铺板密度 0.5-1.5×105个细胞/孔，保持细胞的混合度为 50-80%，使第二天转染时细胞密度为 70-90%。
2. 更换培养基
在转染前将细胞培养孔中完全培养基更换成减血清 MEM 培养基，500 μL/孔。
3．转染复合物配置
质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）的比例为 1:2~1:5，首次试用，建议采用 1:3.75 进行预实验。
1）质粒稀释液准备：将 0.4 μg 质粒加入减血清 MEM 中，使得总体积为 48.5 μL，并轻缓吹打混匀。
2）配置复合物：将 1.5 μL Hi Trans 转染试剂加入到 48.5 μL 质粒稀释液中，轻缓吹打混匀后，室温静置 15-20 min，形成质粒-Hi Trans 复合物，备用。
4．转染细胞
1）直接将 50 μL 的质粒-Hi Trans 复合物加入 24 孔板培养的贴壁细胞中，轻摇混匀。
2）在合适温度与 CO2等条件下(如 37°C, 5% CO2)进行细胞转染，4-6 h 后更换为新鲜完全培养基，轻缓摇匀。
3）在合适温度与 CO2等条件下(如 37°C, 5% CO2)继续培养细胞 24 h-48 h。
备注：不同培养体积细胞转染用量见附表 1。
注意事项
• 为提高转染效率，建议取对数生长期细胞，且活率>95%再进行转染操作；
• 转染过程中推荐使用高质量的质粒，转染的 DNA，A260/A280 在 1.8-2.0 之间，内毒素小于 1 EU/μg。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及生物安全柜操作。
• 本产品仅用于科研用途。
常见问题与解决方案
a) 转染 EGFP 等质粒后未见绿色荧光
在转染的过程中应去除血清，血清的存在会干扰转染过程。
b) 转染后的细胞出现污染
① 在培养基中加入适量抗生素；
② 质粒进行除菌过滤。
附表1 不同细胞培养板转染贴壁细胞时培养基、质粒和试剂用量
| 培养容器 | 表面积（cm²） | 培养基总体积 | DNA（μg） | 转染试剂用量（μL） | 稀释液体积（μL） |
|---|---|---|---|---|---|
| 96孔板 | 0.3 | 100 μL | 0.1 | 0.2-0.5 | 10 |
| 48孔板 | 0.7 | 200 μL | 0.2 | 0.4-1 | 20 |
| 24孔板 | 1.9 | 500 μL | 0.4 | 0.8-2 | 50 |
| 12孔板 | 3.8 | 1 mL | 0.8 | 1.6-4 | 100 |
| 6孔板 | 10 | 2 mL | 2 | 4-10 | 200 |
| 10 cm培养皿 | 60 | 10 mL | 12 | 24-60 | 1000 |
| 25 cm²培养瓶 | 25 | 6 mL | 5 | 10-25 | 600 |
| 75 cm²培养瓶 | 75 | 20 mL | 15 | 30-75 | 2000 |
