Hi Trans Lipo 细胞转染试剂（以下简称“Hi Trans Lipo”）为瀚海新酶最新研发的细胞转染试剂，Hi Trans Lipo 以纳米脂质体包裹核酸通过特殊递送机制，把外源 DNA 转入细胞，对各种常见的细胞系及难转染细胞系如树突状细胞、A549、HepG2、NIH3T3 等均有较好的转染效果，具有低毒高效的特点，对细胞的状态影响较小。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
|---|---|---|
| Hi Trans Lipo 细胞转染试剂 | HSC020121 | 1 mL |
运输及保存方法
冰袋运输。2~8℃保存，有效期 12 个月。
使用说明
贴壁细胞（以 293T 细胞、24 孔板为例，其他培养皿中转染请参考表 1 和表 2）
1.转染前准备
转染前一天细胞用胰酶消化、铺板（含血清不含抗生素），使转染时孔板中细胞密度达到 70%~90%，保证活细胞>90%。转染试剂提前恢复至室温后涡旋、瞬离。
2.准备 DNA-Hi Trans Lipo 复合物
(1)取一支无菌 EP 管，加入不含抗生素和血清的 25 μL Opti-MEM 或无血清培养基，然后加入 Hi Trans Lipo 转染试剂 1.25 μL，轻微吹吸使其混和均匀。
(2)取一支无菌 EP 管，加入 25 μL 不含抗生素和血清的 Opti-MEM 或无血清培养基，然后加入待转 DNA 或质粒，DNA 量为 0.5 μg，轻微吹吸使其混和均匀。
(3)分别吸取将上述含有 DNA 的培养液 25 μL 加入稀释好的 Hi Trans Lipo 的 EP 管中, 轻轻吹打、晃动使混和均匀，室温静置 20 min 形成 DNA-Hi Trans Lipo 复合物。
3.转染细胞
把 DNA-Hi Trans Lipo 复合物全部加入到 24 孔板贴壁培养的 293T 细胞中。逐滴分散加入，轻微晃动。
4.细胞检测
加入 DNA-Hi Trans Lipo 复合物的细胞在 37℃培养 1-2d（无需特意更换培养液），根据实验设计实时观察或收获细胞检测。注：如需进行更长时间培养，可在加入转染复合液 24 h 后，更换为新鲜培养液，以保证细胞生长所需营养成分。如在加完转染复合物 12 h 观察到有细胞生长缓慢，可在转染后 12 h 进行换液。
注意事项
• 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
• 为了您的安全健康，请穿实验服并佩戴手套操作。
• 加入配制完的转染复合物后，无需换液，24 h 或者 48 h 后可进行 DNA 表达的检测。
• 质粒质量：请务必使用高质量转染级无内毒素质粒。通过 260 nm 光吸收测定 DNA 浓度，260 nm/280 nm 比值确定 DNA 纯度（比值应该在 1.8～2.0 的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
• 细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用瀚海新酶特级胎牛血清(Foetal Bovine Serum)（货号：HSC010011）培养细胞。
• 本转染试剂需恢复至室温，涡旋、瞬离后使用。
• 建议配制转染复合物最小体积 30 μL，以免吸取转染试剂量过少，影响复合效果与转染效率。
表1：不同培养体积对应的待转 DNA、Hi Trans、稀释液用量
| 培养器皿 | 推荐铺板个数/孔 | 推荐转染质粒总量 ug/孔 | 转染试剂 μL/孔 | 无血清培养基 μL |
|---|---|---|---|---|
| 96孔板 | 1-3x104 | 0.1 | 0.25 | 2×5 |
| 24孔板 | 0.5-2x105 | 0.5 | 1.25 | 2×25 |
| 12孔板 | 2-3x105 | 1 | 2.5 | 2×50 |
| 6孔板 | 0.5-1x106 | 2 | 5 | 2×100 |
| 60 mm培养皿 | 1-2x106 | 5 | 12.5 | 2×250 |
| 100 mm培养皿 | 2-4x106 | 10 | 25 | 2×500 |
注：DNA 浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，初次使用应优化 DNA 浓度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每 1 μg DNA 使用 2.5~5 μL 体积 Hi Trans 细胞转染试剂进行优化。
