Hi Trans siRNA 转染试剂，是一种基于阳离子高分子聚合物开发的新型转染试剂，适用于 siRNA 及 microRNA(miRNA)的转染。本产品经过配方升级，能在多数常见细胞中实现高效转染、低细胞毒性，且具有操作简便，稳定性好，兼容性强等优点，转染前后不用考虑血清和双抗影响，大部分细胞转染后不需要换液。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
|---|---|---|
| Hi Trans siRNA 转染试剂 | HSC020131-01 | 300 μL |
| Hi Trans siRNA 转染试剂 | HSC020131-02 | 1 mL |
产品组分
| 产品组分 | HSC020131-01 | HSC020131-02 |
|---|---|---|
| siRNA转染试剂 | 300 μL | 1 mL |
| 增强剂 Booster | 1 mL | 3×1 mL |
运输及保存方法
冰袋运输。2~8℃保存，有效期 12 个月，长期不使用建议放置于 -25~-15℃。注：避免反复冻融。
使用说明
（本说明以 24 孔板为例，其他培养皿中转染请参考表 1）
1.接种细胞
对于贴壁细胞：转染前一天，将细胞按照每孔 1-2x105个细胞的量进行铺板，使其在转染时密度为 60%-80%为佳。
2.准备转 Hi Trans siRNA 复合物
(1) 对于每孔细胞，取 1 μL siRNA 溶液（20 μM）与 5 μL Booster 溶液充分吹打，吹打混匀后，吸取 2 μL Hi Trans siRNA 转染试剂与上述混合液混和吹打均匀，室温孵育 5 min。注：本转染试剂需恢复至室温，涡旋、瞬离后使用。
(2) 往上述混合物中加入 12 μL 无菌 PBS 或 Opti-MEM 或细胞完全培养液，形成 20 μL Hi Trans-siRNA 复合物。
3.转染细胞
(1) 把 20 μL 上述 Hi Trans-siRNA 复合物入到 24 孔板的一个孔中，摇动混匀培养板中的液体。
(2) 在 37℃，5% CO2 培养箱培养 24-48 h，之后即可检测基因干扰效果或者后续功能实验。
注意事项
• 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
• 为了您的安全健康，请穿实验服并佩戴手套操作。
• 特别注意，请务必按照图中加样顺序配制转染复合物，切勿将 siRNA 溶液先与稀释液或 Hi Trans siRNA。
• 本转染试剂需恢复至室温，涡旋、瞬离后使用。
• 建议配制转染复合物最小体积为 30 μL，以免吸取转染试剂量过少，影响复合效果与转染效率。
• 整个实验过程使用无 RNA 酶和无热原性的材料，如离心管、枪头、缓冲液。
• 加入配制完的转染复合物后，无需换液，24 h 后可进行 mRNA 检测。如需进行更长时间培养，可在加入 siRNA 转染复合液 24 h 后，更换为新鲜培养液，以保证细胞生长所需营养成分。（可选：如在加完转染复合物 12 h 观察到有细胞生长缓慢，可在转染后 12 h 进行换液。）
• 抑制效率与目的基因和 siRNA 工作环境相关性很大，可根据实验需要增加或减少 siRNA 的用量，获得最佳抑制效率。Hi Trans siRNA 转染试剂经过优化，对细胞基本无毒，比例放大 2-3 倍用量，一般不会对细胞产生明显毒性。
表1：不同培养体积对应的待转 siRNA、Hi Trans、稀释液用量
| 培养器皿 | 培养液体积（mL） | siRNA(20 μM)(μg) | 增强剂 Booster（μL） | 转染试剂 (μL) | 稀释液 (μL) |
|---|---|---|---|---|---|
| 96孔板 | 0.1 | 0.2 | 1 | 0.4 | 2.4 |
| 24孔板 | 0.5 | 1 | 5 | 2 | 12 |
| 12孔板 | 1 | 2 | 10 | 4 | 24 |
| 6孔板 | 2 | 4 | 20 | 8 | 48 |
| 60 mm培养皿 | 4 | 8 | 40 | 16 | 96 |
| 100 mm培养皿 | 10 | 20 | 100 | 40 | 240 |
注：该表使用量仅供参考，具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。稀释液可以是 PBS 或完全培养基等。
