高保真酶 mix 是即用型 2×预混合溶液,包含 DNA Polymerase、dNTPs 以及优化的缓冲体系,预混液中含有预先添加的电泳指示剂,PCR 产物可直接进行电泳,扩增产物为平末端。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可。另外该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| 高保真酶mix | HSM020031 | 5×1mL |
| HSM020031-01 | 250 μL |
使用方法
1. 推荐 PCR 反应体系
| 组分 | 规格(μL) | 终浓度 |
|---|---|---|
| 高保真酶 mix* | 25 | 1× |
| 模板** | x | - |
| 正向引物 F(10 μM)*** | 2 | 0.4 μM |
| 反向引物 R(10 μM) | 2 | 0.4 μM |
| ddH2O | Up to 50 | - |
*在 1×预混液含有 2 mM Mg2+ 和 200 μM 的 dNTPs。
**推荐范围 10-200 ng;cDNA 样本上样量范围不超过反应体系的 1/10,推荐 1-2.5 μL。
***PCR 反应体系中引物终浓度的范围为 0.2-1 μM,推荐 0.4 μM。
2. 反应程序
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
|---|---|---|---|
| 预变性 | 98℃ | 30 sec | 1 |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| 退火* | 60℃ | 5 sec | |
| 延伸** | 72℃ | 5-10 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min | 1 |
*推荐温度:60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为 5 sec,可以在 5-30 sec 内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
**延伸时间:推荐 5 sec/kb,也可根据需要,适当延长至 10 sec/kb。
注意事项
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
