Universal U+ Multiple Probe qPCR Master Mix（ONE TUBE） 是以 DNA 为模板的多重荧光定量 PCR 试剂盒，其搭配了经升级改造的 Taq DNA 聚合酶，对模板类型、模板 GC 含量和引物 Tm 值具有更高的兼容性。通过高特异性抗体封闭其在低温及室温下的 5’→ 3’ 的聚合酶活性和双链特异性 5’→ 3’的核酸外切酶活性，在扩增体系配制至 PCR 扩增前， 不会产生由于引物错配而形成的非特异性扩增，最大程度降低非特异扩增和引物二聚体的形成，提高检测的灵敏度和特异性。该产品引入 UDG 防污染体系，能有效防止扩增产物气溶胶污染。经过特殊优化的反应缓冲液，与热启动 Taq DNA 聚合酶（抗体修饰）制成预混试剂，最大限度保证了储存过程中酶的稳定性， 配置体系前只用加入引物模板以及水，大大简化了配制步骤，试剂同时支持引物探针提前预混。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| Universal U+ Multiple Probe qPCR Master Mix（ONE TUBE） | HMD3808N-01 | 100 rxn |
| HMD3808N-02 | 1000 rxn | |
| HMD3808N-03 | 5000 rxn |
产品组分
| 组分 | 货号 | 规格 |
| 2×TaqManqPCR Master Mix | HMD3808N-01 | 1 mL |
| HMD3808N-02 | 10 mL | |
| HMD3808N-03 | 50mL |
注意事项
• 操作过程中请使用 RNasefree 耗材
• 吸取反应液时应尽量避免气泡，进行上机时请检查 PCR 管管盖是否盖紧以避免液体蒸发导致的结果不准确及扩增产物污染
• 样本前处理应在生物安全柜进行，实验过程中使用的吸头应直接打到 10%次氯酸废液缸中，反应结束后的 PCR 管切勿开盖，需与其它废弃物灭菌后丢弃
• 试剂使用前请充分融化混匀，不同批号试剂不宜混合使用
反应体系
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 2×TaqManqPCR Master Mix | 10μL | 1x |
| PrimerMixa | x | 0.1-1μM |
| TaqManProbeMixb | y | 50-300nM |
| 模板 DNAc | 1pg-1μg | - |
| 无核酸酶水 | Up to 20μL | - |
a:引物浓度通常为 0.2μM，当扩增性能较差时可根据实际情况自行优化。
b:可以使用含有多个荧光信号的探针，不同信号的探针终浓度可在 50-300nM 之间调整。
c:推荐 20μL 或 50μL 反应体系，可根据实际需求调整模板上样量。
反应程序
标准程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 污染消化 | 37℃ | 2min | 1Cycle |
| 预变性 | 95℃ | 2min | 1Cycle |
| 变性 | 95℃ | 15s | 45Cycles |
| 退火 d | 60℃ | 30s |
d: 建议的退火温度为 60℃，可根据设计引物实际 Tm 值进行调整，一般设置成低于引物 Tm 值 3-5℃即可。
