Universal TaqMan Multiplex qPCR One-Step Master Mix(UDG plus) 是以 RNA 为模板的一种多重荧光定量 PCR 试剂盒。在反应过程中， 逆转录和定量 PCR 在一管内完成，简化了实验操作。本产品含有 UDG 酶， 能有效防止扩增产物气溶胶污染的风险。本试剂盒选用耐热逆转录酶可高效合成第一条链 cDNA，并且选用最佳比例的 Hot Start Taq DNA 聚合酶（抗体修饰）和 RNase 抑制剂， 配合添加抑制非特异性扩增及提升多重定量扩增效率的增强剂缓冲液体系，检测灵敏度可达 0.1 pg，能够提供稳定可靠的扩增，可进行多达四重的反应。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| Universal TaqMan Multiplex qPCR One-Step Master Mix(UDG plus) | HMD3906-01 | 100 rxn |
| HMD3906-02 | 1000 rxn | |
| HMD3906-03 | 10000 rxn |
产品组分
| 组分 | 规格 | ||
| HMD3906-01 | HMD3906-02 | HMD3906-03 | |
| 2×OneStepBuffer EnzymeMix | 1.25 mL 100μL | 12.5 mL 1 mL | 125 mL 10 mL |
注：a. 2×One Step Buffer 包含 dNTP 2＋ Mix 、Mg 。
b.Enzyme Mix（UDG plus） 主要包含反转录酶、Hot Start Taq DNA 聚合酶（抗体修饰）、 RNase 抑制剂及 UDG 酶。
c.ROX: 需根据检测仪器机型自行选择校正。
注意事项
在实验过程中请使用 RNasefree 耗材。
反应体系
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 2×OneStepBuffer EnzymeMix（UDGplus） | 12.5μL 1μL | 1× - |
| PrimerMix | x | 0.1-1μM |
| TaqManProbeMix | y | 50-300nM |
| 模板 RNA | 1pg-1μg | - |
注：a. 引物浓度通常为 0.2 μM，当扩增性能较差时，可根据情况在 0.1-1.0 μM 范围内进行。
b.可以使用含有多个荧光信号的探针，每种不同信号的探针终浓度可在 50-300 nM 之间调整。
c.qPCR 灵敏度极高，推荐将模板进行稀释后加入反应体系中，控制 Ct 值范围在 20-35 之间适宜。
d.反应体系推荐使用 25 μL 或 50 μL。
e.扩增产物长度选择在 80 -250bp 范围内。
f.使用前请充分溶解后吸取，避免剧烈震荡产生过多气泡。
扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 反转录 | 50℃ | 15min |
| 预变性循环45× | 95℃ | 3min |
| 94℃ | 15s |
注：a.对于具有复杂二级结构或高 GC 含量的模板，建议将逆转录温度提升至 55℃，有利于提高扩增效率。
b.扩增反应温度可根据引物 Tm 值进行调整。
c.时间根据扩增片段大小，一般按 1 kb/min 进行计算。
