PicoGreen 是一种特异性结合双链 DNA (dsDNA) 的饱和荧光染料，激发波长为 480 nm，发射波长为 520 nm，与大多数荧光计和荧光酶标仪兼容。PicoGreen 仅与 dsDNA 结合后才发出荧光，不受核苷酸和单链核酸的影响，产生的荧光强度与 dsDNA 浓度成正比， 且无序列依赖性，非常适合于 dsDNA 的定量检测，可检出 25 pg/mL~ 1μg/mL 浓度范围内的 dsDNA。
由于 PicoGreen 灵敏度高、特异性强、耐受性好、无需纯化 DNA，从 2010 版中国药典开始，已被列为生物制品 DNA 残留检测的标准方法之一。根据药典说明，当 dsDNA 浓度在 1.25 ng/mL~80 ng/mL 范围内时线性最 2 好 (R >0.99)。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| PicoGreen | HSM030111 | 1 mL |
使用说明
1.染料工作液配制
PicoGreen 原液以浓缩液形式保存在无水的 DMSO（二甲基亚矾)中。实验时，一般应将原液用 1× TE 按 1:100 的比例稀释，配制成 2×染料工作液，然后按 1:1 比例与待测样品混合，使 PicoGreen 终浓度为 1×。由于本试剂容易吸附到玻璃表面，应在塑料容器中配制,并注意尽量避光。染料工作液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。
2．实验方法
①标准液配制
取 Sigma 小牛胸腺 DNA 干粉 1 mg（Tris， NaCI 等浓度已成标准体系），加入 1 ml 双蒸水，配制成 1 mg/mL 的标准液。
②染料工作液配制
取 10 μL PicoGreen 原液，加入 990 μL 1× TE 缓冲液，配制成 2×染料工作液。
③标准品工作液配制
a.母液稀释：取 10μL (1 mg/mL)标准液加入到 990μL 1xTE 缓冲液中，稀释成 10 μg/mL 标准品工作液；再取 10μL(10 μg/mL)标准品工作液液加入到 990μL 1×TE 缓冲液中，稀释成 100ng/mL 的标准品工作液。
b.倍比稀释：取 800μL(100ng/mL)的标准品工作液加入到 200μL1xTE 缓冲液中，浓度为 80 ng/mL；再取 500μL(80ng/mL)标准品工作液加入到 500uL 1xTE 缓冲液中，稀释到 40ng/mL；依次倍比稀释，配成 20 ng/mL、 10 ng/mL 、 5.0 ng/mL 、 2.5 ng/mL 、
1.25ng/mL 的标准品工作液。
④标准曲线绘制：
分别将倍比稀释后的 1.25ng/mL~80ng/mL 标准品工作液和 2x 染料工作液按 1:1 体积混匀（具体体积根据荧光设备和容器的要求确定），避光、室温放置 5 min。使用荧光仪检测样品的荧光值：将混合后的溶液加入微量比色皿，注意不要在样品中引入气泡，轻弹比色血外部以驱散气泡。以 1xTE 缓冲液为空白对照，设定激发波长 480nm，发射波长 520nm， 在恒定温度下测定样品和空白对照的荧光值。 或者使用 96 孔酶标板在荧光酶标仪中检测。 检测结束后，以各浓度荧光值减去空白对照荧光值，再与标准品溶液浓度 (ng/mL)进行线性回归，绘制标准曲线。
⑤待测样品浓度测定：
将待测样品溶液和 2×染料工作液按 1:1 体积混匀，采用④中同样的方法，在相同温度下测定待测样品的荧光强度（必要时先使用 TE 缓冲液将待测样品稀释到 PicoGreen 线性范围之内），根据标准曲线的线性回归方程，计算待测样品浓度。
注意事项
1.荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光， 以减缓荧光淬灭；
2.PicoGreen 工作液最好现配现用，以保证最佳结果；
3.PicoGreen 荧光强度受温度影响较大，应保证绘制标准曲线和样品测定在同一恒定温度下进行；
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
