本产品原始序列来源于人源 Rhinovirus 14编码的 3C Protease,重组表达于 E.coli,能够特异性切割氨基酸序列 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓-Gly-Pro,可有效切断含 HRV 3C Protease 识别序列的融合蛋白质的标签序列,常用于去除融合蛋白的 Glutathione S-transferase (GST) 、 Maltose-Binding Protein(MBP) 、 Small Ubiquitin-like Modifier(SUMO)、His 或者其它标签。本品在C-末端有 6 个 HIS 标签, 用镍柱亲和层析的方法极易从蛋白酶反应液中去除。本酶在4℃仍具有活性,可在低温下操作,不影响目的蛋白质的活性或稳定性。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| 重组 HRV-3C 蛋白酶 | HBP000138-1 | 500U/0.25mL |
| HBP000138-2 | 2000U/1mL |
活力定义
以自产融合蛋白为底物,在 1xHRV 3C buffer的体系下,4℃反应 16 小时,切割 100ug 底物,切割效率大于 95%所需要的酶量定义为 1个酶活单位。
应用场景
用去切除含 HRV 3C Protease 识别序列的融合蛋白质的标签序列。
储存条件及有效期
-80~-20°C 保存。有效期 1 年。尽量避免反复冻融。
运输条件:干冰运输
储存缓冲液
20mMTris-HCl, pH7.4
100mM NaCl
20% Glycerol
10X 反应缓冲液
0.5MTris-HCl,1.5MNaCl, 10mM EDTA ,
10mM DTT, pH 7.5 @25℃
SDS-PAGE 纯度鉴定(≥95%)

活性鉴定


注意事项
1. 由于蛋白质的初级和二级结构以及反应缓冲液不同,切断效率会有所不同,因此,需要进行预实验来确定 HRV 3C Protease 的适宜添加量。
2. 可以在 4℃~37℃进行反应,但 4℃是推荐的标准反应温度。
3. 磷酸缓冲液中酶活会有所降低。此外甘油和咪唑的存在也会降低酶活。变性剂如尿素和酸胍,可以显著降低酶活。
4. 本产品仅限于科研用途,不得用于医疗食品及工业化生产等领域。
