三代逆转录一管化预混液是一款高效、便捷、减少污染的高质量一链cDNA合成预混液,包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反应Buffer、RNA酶抑制剂、dNTPs、Oligo(dT)20VN和随机引物等一链cDNA合成所需的所有组分,仅需加入RNA模板和水即可开始反应,操作非常方便。使用该逆转录预混液15分钟内最长可获得12 kb大小的cDNA。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 三代逆转录一管化预混液 | HSM080021-01 | 100 rxn |
| HSM080021-02 | 5 rxn |
产品组分
| 组分 | HSM080021-01 | HSM080021-02 |
| 三代逆转录一管化预混液 | HSM080021A 400 μL | HSM080021A 20 μL |
| Nuclease-Free Water | HSM080021B 2×1 mL | HSM080021B 1 mL |
使用方法
1. 反应体系按下表配置(冰上操作):
| 组分 | 体积 |
| 模板 RNAa | 50 ng~1 μg |
| 三代逆转录一管化预混液 | 4 μL |
| Nuclease-Free Water | To 20 μL |
a. 推荐使用试剂盒提取的已去除基因组 DNA 污染的高质量 RNA 作为模板。
2. 轻柔吸打混匀,瞬离;
3. 55℃孵育 15 min;
注:若目标 RNA 不含 Poly(A)结构,可预先 25℃温育 10 min。
4. 反应结束后,85℃孵育 5 min 终止反应;
5. 迅速将获得的 cDNA 置于冰上,用于后续实验;cDNA 溶液置于-20℃储存,建议不超过 1 周;置于-80℃可长期储存。
注意事项
预混液中已经包含 Oligo(dT)20VN 和随机引物,不仅适用于包含 Poly(A)结构的真核生物 mRNA,也适用于不含 Poly(A)结构的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 等模板,但不适用于 miRNA 等小 RNA 模板。
