RNase T1 是一种来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)的核糖核酸内切酶，可特异性地在单链 RNA 的鸟嘌呤核糖核苷酸(G)后进行切割，产生 3′磷酸末端。RNase T1 能够形成核苷 2′，3′-环磷酸中间体，以切割 3′-鸟苷残基与邻近核苷 5′-OH 基团之间的磷酸二酯键，产生含末端 3′-GMP 的寡核苷酸和 3′-GMP。RNase T1 的活性不依赖于金属离子。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
| 核糖核酸酶T1 | HSM060121-01 | 100 KU |
| HSM060121-02 | 500 KU |
产品组分
| 组分 | HSM060121-01 | HSM060121-02 |
| RNase T1 (500 U/μL) | 200 μL | 5×200 μL |
| 10× RNase T1 Buffer | 1 mL | 5×1 mL |
活性定义
1 活性单位(U)是指在 37℃，pH7.5 条件下，以酵母 RNA 为底物，使 A260 变化 1.0 所需要的酶量。
质量控制
蛋白纯度：经 SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于 95%。
非特异性内切酶活性：37℃下，在 20μL 反应体系中将 500 U RNase T1 与 200 ng 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于 20%的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。
DNase 活性：37℃下，在 20μL 反应体系中将 500U RNaseT1 与 15 ng 双链 DNA 片段共同温育 16h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链 DNA 片段无变化。
产品应用
1. 去除 DNA 中的 RNA；
2. 去除重组蛋白中的 RNA；
3. RNA 测序；
4. 用于核糖核酸酶保护试验（与 RNase A 结合使用）；
5. 测定不含 G 或低 G 含量 DNA 模板的转录水平。
使用方法
1. 反应体系：
| 试剂 | 体积 | 终浓度 |
| ssRNA | 1~10 μg | 50-500 ng/μL |
| 10×RNase T1 Buffer | 2 μL | 1× |
| RNase Inhibitor (40 U/μL)* | 1 μL | 2 U/μL |
| RNase T1 (500 U/μL) | 0.4 μL | 10 U/μL |
| Nuclease-Free Water | Up to 20 μL | - |
注：为避免 RNase A 等环境中的 RNase 污染使底物 RNA 降解，建议在反应体系中加入 RNase Inhibitor（货号：HBP000402），底物 RNA 应在 RNase Inhibitor 加入并混匀之后加入。
2. 建议反应条件：
37℃孵育 15min。可根据实际情况适当延长或缩短孵育时间以达到最佳酶切效果。
注意事项
1. 多种金属离子可抑制 RNase T1 的活性，包括 Mg2+ (100 mM MgCl2约抑制 40%的活性)、Ca2+ (10 mM CaCl2约抑制 30%的活性)、Zn2+、Fe2+、Cu2+ 等。除此之外，Guanylyl 2′-5′ guanosine 是 RNase T1 的特异性抑制剂。
2. RNase T1 的热失活是可逆的，建议通过柱纯化或酚/氯仿抽提的方法去除 RNase T1。
3. 在 pH6.0 的溶液中，RNase T1 可耐受 100℃加热 10min；但在 pH>9.0 的碱性溶液中不稳定。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。
