毛细管凝胶电泳是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳。凝胶具有多孔性,起类似分子筛的作用, 溶质按分子大小逐一分离。凝胶粘度大, 能减少溶质的扩散, 所得峰形尖锐,,能达到 CE 中最高的柱效。本产品本用于检测 RNA 片段百分比以及片段大小,含有变性剂,能够打开单链中的二级结构,维持片段的单链状态。核酸片段在阳极端用电动进样或压力进样的方式注入,然后使用高压电场根据分子量大小快速分离核酸片段。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| RNA检测试剂盒(毛细管凝胶电泳法) | HBP005011-1 | 100T |
| HBP005011-2 | 500T |
运输与保存方法
1. RNA 分子量标准品,核酸染料,RNA 样品稀释液,空白溶液干冰运输,其余组分 2-8℃运输。
2. 收到试剂盒后,RNA 分子量标准品,核酸染料,RNA 样品稀释液,空白溶液置于-85~-65 ℃保存,其余组分 2~8℃保存。
产品组分
| 组分 | HBP005011-1 | HBP005011-2 |
|---|---|---|
| RNA分离胶 | 50mL | 250mL |
| 2× RNA入口缓冲液 | 100mL | 250mL |
| 5× 清洗液 | 100mL | 100mL |
| RNA样品稀释液 | 1支,4mL | 3支,4mL |
| 核酸染料 | 1支,10μL | 1支,30μL |
| RNA分子量标准品 | 1支,20μL | 5支,20μL |
| 空白溶液 | 8mL | 8mL |
| 0.25xTEbuffer | 50mL | 50mL |
使用说明
RNALadder 准备(为避免反复冻融,建议用无核酸酶 PCR 管分装后置于-80℃保存)
1. 从-80℃冰箱取出分装的 PCR 管,于冰上解冻。
2. 吸取 2μLRNA Ladder,加入 22μL RNA 样品稀释液。
3. 70℃热变性 2 分钟后,立即置冰上冷却 5分钟。
RNA 样品准备
1. 吸取 2μL RNA 样品,加入 22μL RNA 样品稀释液。
2. 推荐样品浓度为 5ng/μL-100ng/μL,如果样品浓度超过上限,用无核酸酶水稀释样品。
3. 70℃热变性 2 分钟后,立即置冰上冷却 5分钟。
试剂准备
1.将核酸染料按 1:10000 体积比加入 RNA分离胶中,混匀后加入 Gel1 试剂管中。
2. 将 5× 清洗液用去离子水或超纯水稀释至1× 清洗液后加入到仪器 Condition 试剂管中。
3. 将 2× RNA 入口缓冲液用去离子水或超纯水稀释至 1× RNA 入口缓冲液后加入到Buffer 盘(毛细管入口相对应的孔)中,1ml/孔。
检测操作过程
1. 吸取热变性好的 RNA Ladder 和 RNA 样品到 96 孔板中。
2. 在仪器上选择使用的托盘和位置,并输入样品名称。
3. 选择方法,设定方法参数后加入队列。点击开始按键,运行方法。
产品性能
| 项目 | 指标 |
|---|---|
| RNA分子量大小范围 | 200-6000nt |
| 分子量准确度 | ±10% |
| 分子量精密度 | 5% |
| 检测限(信噪比>3) | 1ng/μL |
| 定量范围 | 20ng/μL~100ng/μL |
| 定量准确度 | ±20% |
| 定量精密度 | 10% |
注意事项
• 使用本试剂盒所检测片段大小为根据样品及 RNA 分子量标准品相对出峰时间计算得出,仅供参考,不代表样品真实的片段大小。
