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肽N-糖苷酶 F (高浓版)
肽N-糖苷酶 F (高浓版)

英文名称:Peptide N-glycosidase F (high concentration version)

  • 3551
  • 3570
45uL
HBP003013-1
180uL
HBP003013-2
1000uL
HBP003013-3
货号:HBP003013

储存方法: -25~-15℃运输

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肽N-糖苷酶F是从糖蛋白中去除几乎所有N-糖链的最有效的方法。肽N-糖苷酶F是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的N-连接糖链。切割 糖型有:高甘露糖型、杂合型和复杂型,切割位点为最内侧的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键。通常使用肽N-糖苷酶F水解释放抗体N-糖链需要几个小时的孵育时间,然后进行聚糖衍生和液相色谱或质谱分析。若去糖基化不完全,获得的糖链分布不能代表治疗性抗体的正确组成。 

肽N-糖苷酶F(高浓版)是一种改进的试剂,可以在几分钟内完成抗体和融合抗体的快速去糖基化。所有的N-糖链都能快速无偏好地释 放出来,并准备好进行下游色谱或质谱分析,进而快速的对糖基化抗体确定糖型。


技术指标
外观 无色透明液体
糖苷外切酶 无检出
糖苷内切酶F1 无检出
糖苷内切酶F2 无检出
糖苷内切酶F3 无检出
糖苷内切酶H 无检出
蛋白酶 无检出

酶学性质
来源 微生物
分类 EC 3.5.1.52
分子量 35kDa(SDS-PAGE)
等电点 8.14
最适pH 7.0-8.0
最适温度 65℃
底物选择性 水解蛋白质的Asn相连的N-糖链,使N-聚糖保持完整
抗体水解位点 完整地水解糖基化抗体的糖链
激活剂 DTT
抑制剂 SDS
储存温度 -25~-15°C
失活条件 含1μL肽N-糖苷酶F(高浓版)的20μL反应混合物在75°C孵育10min即可失活

用途

用于糖基化抗体的快速去糖基化,分离纯化的糖链可用于后续的质谱鉴定抗体的糖型。


试剂组成
货号 HBP003013-1 HBP003013-2 HBP003013-3
PNGaseF (High concentration) 45µL 180µL 1000µL
PNGaseF缓冲液 500µL 1000µL 5000µL
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