2 x HY Taq 预混液（含染料 II）包含高产 Taq DNA 聚合酶、Mg2+、dNTP 以及含有增强剂的缓冲液组成。高产 Taq DNA 聚合酶具有 3′→5′外切酶活性，具有校正功能。本产品拥有更强的扩展能力，以基因组为模板可以扩增 12kb 以内的片段，以质粒或 λDNA 为模板可以扩增 15kb 以内的片段，产量也高于普通 Taq DNA Polymerase。PCR 产物的 3′端带 A，可直接用于 T/A 克隆。2×的预混液简化了实验操作，进行 PCR 反应时只需要额外添加引物和模板，可减少人为误差和降低污染，产品中已添加染料，PCR 产物可直接进行电泳。本产品扩增效率高、特异性强、灵敏度高，可用于普通 PCR、RT-PCR。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
|---|---|---|
| 2 x HY Taq预混液（含染料Ⅱ） | HTM000511 | 5ml |
| HTM000512 | 15ml | |
| HTM000513 | 50ml |
产品组分
| 组分 | HTM000511 | HTM000512 | HTM000513 |
|---|---|---|---|
| 2 x HY Taq预混液（含染料Ⅱ） | 1ml×5 | 1ml×15 | 1ml×50 |
质量控制
核酸外切酶残留检测：50 μl 反应体系中加入 25 μl 本品与 1 μg λ-Hind III 在 37℃下孵育 16h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：50 μl 反应体系中加入 25 μl 本品与 1 μg λDNA，37℃孵育 16h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
Nickase 残留检测：50 μl 反应体系中加入 25 μl 本品与 1 μg Supercoiled pBR322 DNA，37℃孵育 16h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
功能检测：50 μL PCR 反应体系中加入 25 μl 本品，分别用 2 ng λDNA、100 ng 人基因组 DNA 为模板扩增 15 kb 与 12 kb 的目的片段，扩增 35 个循环后，琼脂糖凝胶电泳，可见有单一的特异性 5kb 条带。
储存稳定性：将本试剂反复冻融 10 次，扩增性能无下降。
使用说明
反应体系
| 组分 | 体积 |
|---|---|
| 2 x 高产 Taq 预混液 | 25 μl |
| 上游引物（10 μM） | 2 μl |
| 下游引物（10 μM） | 2 μl |
| 模板 DNAa | x μl |
| ddH2O | up to 50 μl |
a. 50 μl 反应体系推荐模板用量如下表：
| DNA | 用量 |
|---|---|
| 动植物基因组 DNAa | 0.1-1 μg |
| 质粒 DNA | 0.1-10 ng |
| cDNA | 1-5 μl |
| λDNA | 0.5-10 ng |
反应程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
|---|---|---|---|
| 预变性a | 95℃ | 3min | |
| 变性 | 95℃ | 15s | 30-35 cycles |
| 退火b | 55℃ | 15s | |
| 延伸 | 72℃ | 1kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5min |
a. 对于复杂模板，可将预变性时间增加到 5min；
b. 退火温度设置成低于引物 Tm 值 3-5℃范围内，无扩增时可降低退火温度，提高退火温度可减少非特异扩增。
