2×Rapid Taq Super Mix 包含 Rapid Taq DNA 聚合酶、Mg2+、dNTP 以及含有增强剂的缓冲液，扩增速度可达 15s/kb，2kb 以内片段的极限扩增速度可达 1s/kb，大幅缩短了 PCR 反应时间。本产品可有效进行 5kb 以内以基因组为模板的扩增，以及 15kb 以内以 λDNA 和质粒为模板的扩增。2×Mix 的预混液简化了实验操作，进行 PCR 反应时只需要额外添加引物和模板，可减少人为误差和降低污染，同时产品含有电泳缓冲液和绿色染料，PCR 产物可直接进行电泳。PCR 产物 3′端带 A，可用于 T/A 克隆。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
|---|---|---|
| 2×Rapid Taq Super Mix | HTM000601 | 5×1mL |
| HTM000602 | 15mL |
产品组分
| 组分 | HTM000601 | HTM000602 |
|---|---|---|
| 2×Rapid Taq Super Mix | 1mL×5管 | 15mL×1管 |
适用范围
快速 PCR 法扩增 DNA。
使用说明
反应体系
| 组分 | 体积 |
|---|---|
| 2×Rapid Taq Super Mix | 25 μL |
| 上游引物（10 μM） | 2 μL |
| 下游引物（10 μM） | 2 μL |
| 模板 DNAa | x μL |
| ddH2O | up to 50 μL |
a. 50 μL 反应体系推荐模板用量如下表：
| DNA | 用量 |
|---|---|
| 动植物基因组 DNA | 1-200 ng |
| 质粒 DNA | 0.1-10 ng |
| cDNA | 1-5 μL |
| λDNA | 0.5-10 ng |
反应程序
目的片段≤2kb
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
|---|---|---|---|
| 预变性a | 95℃ | 3min | |
| 变性 | 95℃ | 15s | 30-35 cycles |
| 退火b | 55℃ | 15s | |
| 延伸 | 72℃ | 1s/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5min |
目的片段＞2kb
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
|---|---|---|---|
| 预变性a | 95℃ | 3min | |
| 变性 | 95℃ | 15s | 30-35 cycles |
| 退火b | 55℃ | 15s | |
| 延伸 | 72℃ | 15s/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5min |
a. 对于结构复杂或高 GC 含量的模板，可延长预变性时间至 5~10min。
b. 退火温度设置成低于引物 Tm 值 3-5℃范围内，无扩增时可降低退火温度，提高退火温度可减少非特异扩增。
