Taq DNA连接酶是一种耐高温连接酶，它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5′-磷酸和3′-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对，且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此，可以用于单碱基替换检测。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子，在45~65℃范围内均有活性。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| Taq DNA连接酶 | HSM060011 | 1000 U |
产品组分
| 组分 | 规格 |
| Taq DNA连接酶 (40 U/μL) | 25 μL |
| 10× Taq DNA Ligase Buffer | 1 mL |
注：1 U=1 Weiss unit
酶活单位定义
在50 μL反应体系中，45℃条件下温育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
酶活检测条件
将DNA底物（20 μg/mL）和1× Taq DNA Ligase反应缓冲液45℃温育15 min，加入终止染液（50%甘油，50 mM EDTA和溴酚兰）终止反应，70℃加热10 min后经0.7%琼脂糖凝胶电泳，由于连接反应，经BstEII消化的λDNA粘端在70℃温育后仍将保持在一起。
质量控制
核酸内切酶残留测试：在反应体系中加入超螺旋的DNA底物，孵育4 h，经琼脂糖凝胶电泳，无肉眼可见的环状切口DNA出现。
核酸外切酶残留检测：将酶液与双链DNA底物在37℃温育16 h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。
宿主检测：将酶液中残留的核酸经E.coli 16S rDNA特异性的TaqMan qPCR检测，E.coli基因组残留低于10拷贝。
使用方法
① 于冰上配制如下反应体系：
| 试剂 | 体积 |
| DNA | up to 1 μg |
| 10× Taq DNA Ligase Buffer | 5 μL |
| Taq DNA连接酶 | 2 μL |
| ddH2O | to 50 μL |
② 充分混匀并瞬离，45℃温育15 min；
③ 加入终止液（50%甘油，50 mM EDTA和溴酚兰）终止反应，不可热失活。
