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热稳定核糖核酸酶T1
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热稳定核糖核酸酶T1

英文名称:Thermostable RNase T1

  • 4299
100 KU
HSM060181-01
500 KU
HSM060181-02

货号:HSM060181-01、HSM060181-02

运输及保存方法:-25~-15℃运输与保存。

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Thermostable RNase T1 是一种基于 RNase T1 经过蛋白定向进化得到的耐热突变体。与野生型 RNase T1 相比,Thermostable RNase T1 能够在 50℃的条件下保持 100%的活性,而野生型在同样的温度下活性至少下降 50%。更高的反应温度有助于充分打开 RNA 的二级结构,减少或避免其对酶切的影响,从而使酶切过程更加彻底。


产品信息

产品名称货号包装规格
热稳定核糖核酸酶T1HSM060181-01100 KU
HSM060181-02500 KU


产品组分

组分HSM060181-01HSM060181-02
Thermostable RNase T1
(500 U/μL)
200 μL5×200 μL
10× RNase T1 Buffer1 mL5×1 mL


活性定义

1 活性单位(U)是指在 37℃,pH7.5 条件下,以酵母 RNA 为底物,使 A260 变化 1.0 所需要的酶量。


质量控制

蛋白纯度:经 SDS-PAGE 凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于 95%。

非特异性内切酶活性:37℃下,在 20μL 反应体系中将 500 U Thermostable RNase T1 与 200 ng 超螺旋质粒 DNA 共同温育 4h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于 20%的质粒 DNA 转变成缺刻或线性状态。

DNase 活性:37℃下,在 20μL 反应体系中将 500U ThermostableRNase T1 与 15 ng 双链 DNA 片段共同温育 16h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链 DNA 片段无变化。


产品应用

1. 去除 DNA 中的 RNA;

2. 去除重组蛋白中的 RNA;

3. RNA 测序;

4. 用于核糖核酸酶保护试验(与 RNase A 结合使用);

5. 测定不含 G 或低 G 含量 DNA 模板的转录水平。


使用方法


1. 反应体系:

试剂体积终浓度
ssRNA1~10 μg50-500 ng/μL
10×RNase T1 Buffer2 μL
RNase Inhibitor (40 U/μL)*1 μL2 U/μL
Thermostable RNase T1 (500 U/μL)0.4 μL10 U/μL
Nuclease-Free WaterUp to 20 μL-

注:为避免 RNase A 等环境中的 RNase 污染使底物 RNA 降解,建议在反应体系中加入 RNase Inhibitor(货号:HBP000402),底物 RNA 应在 RNase Inhibitor 加入并混匀之后加入。


2. 建议反应条件:

50℃孵育 15min。可根据实际情况适当延长或缩短孵育时间以达到最佳酶切效果。


注意事项

1. Thermostable RNase T1 的热失活是可逆的,建议通过柱纯化或酚/氯仿抽提的方法去除 Thermostable RNase T1。

2. RNase 相关实验请在通风橱或特定区域进行,以避免对其他实验产生影响。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。

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