Thermostable RNase H,耐热 RNase H,是一种在较高温度(65℃以上)时仍然保持活性的核糖核酸内切酶(endoribonuclease)。
Thermostable RNase H 可以选择性识别并酶切 RNA:DNA 杂合双链中的 RNA 链,同时杂合双链中的 DNA 会保持完整。Thermostable RNase H 不会降解单链或双链的 RNA 或 DNA。
产品信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 |
| 热稳定RNase H | HSM060061 | 200 U |
产品组分
| 组分 | 规格 |
| Thermostable RNase H (5 U/μL) | 40 μL |
| 10×RNase H Reaction Buffer | 1 mL |
活性定义
以 40 pmol 荧光标记的 25 bp RNA:DNA 杂交体为底物,在 50 μL 反应体系中,50℃条件下,20min 内产生 1 nmol 核糖核苷酸所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
产品应用
1. 高精度 RNA 结构图谱制备和 mRNA 加帽率分析。
2. cDNA 第二链合成中去除 mRNA;提高 RT-qPCR 效率。
3. 在 Oligo(dT)存在下除去 mRNA 的 Poly(A)末端。
4. 等温扩增实验中的组份。
质量控制
非特异性内切酶活性检测
将 5U 的本酶与超螺旋质粒 DNA 在 37℃温育 4h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。
DNase 残留检测
将 5U 本酶与双链 DNA 底物在 37℃温育 16h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。
RNase 残留检测
将 5U 的本酶与 500ng RNA 在 37℃温育 1h,使用琼脂糖凝胶电泳检测超过 90%的 RNA 仍保持完整。
宿主 DNA 残留检测
本品中大肠杆菌宿主细胞 DNA 残留量低于 10 拷贝/5U。
注意事项
1. Thermostable RNase H 反应缓冲液包含 MgCl2。目标 RNA:DNA 杂交体和其它单链 RNA(总 RNA)在高温下使用 Thermostable RNase H 时,建议控制反应时间和温度,以降低金属离子的单链 RNA 的降解。
2. Thermostable RNase H 可以通过添加蛋白酶 K 或过量的 EDTA 来失活。
3. 最佳反应温度>65℃,最高 95℃。Thermostable RNase H 在 65℃时的活性是 37℃时的 3 到 4 倍。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并带一次性手套操作。
